ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。在ELISA實(shí)驗(yàn)時經(jīng)常出現(xiàn)解答ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)顯色完成后，肉眼可見整板沒有顯示反應(yīng)即白板異常情況，解答ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板異常的原因總結(jié)如下表：

總結(jié)以上避免白板，ELISA操作應(yīng)注意事項(xiàng)：

1、確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈，不含酶抑制劑，如疊氮鈉等；

2、每次配制時都應(yīng)看清標(biāo)簽標(biāo)明物質(zhì)；

3、加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現(xiàn)象。