ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）是一種廣泛應用于生物學、醫(yī)學和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域中的免疫分析技術(shù)。它通過抗原或抗體與固相載體的結(jié)合，以及酶標記物的催化反應，實現(xiàn)對特定分子的檢測和定量。

基本原理：

ELISA利用抗原或抗體的特異性結(jié)合，將它們固定在固相載體上（如96孔板），然后通過酶標記的抗體與底物反應產(chǎn)生可檢測信號。這種方法可以實現(xiàn)對微量物質(zhì)的高靈敏度和高特異性檢測。

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）實驗中，三個關(guān)鍵的必要試劑：

1. 包被抗體/抗原：這是試劑盒的“靈魂"所在。它們預先被固定在96孔板內(nèi)壁上，用作捕獲目標抗原或抗體的錨點。這些抗原或抗體能夠特異性地結(jié)合樣品中的目標分子。

2. 酶標記抗體：這個試劑是實現(xiàn)高靈敏度檢測的關(guān)鍵。它結(jié)合了高度特異性的抗體與具有催化活性的酶，如辣根過氧化物酶（HRP）。當酶標記抗體與孔板上的抗原或抗體結(jié)合后，酶會催化底物發(fā)生化學反應，產(chǎn)生顯色產(chǎn)物，從而實現(xiàn)信號放大和檢測。

3. 底物溶液：底物是酶的反應物，本身無色，但在酶的作用下會發(fā)生化學變化，生成有色產(chǎn)物。這個顯色反應的深度與樣品中目標分子的濃度成正比，因此通過測量顯色的深淺，可以定量分析目標分子的含量。常用的底物包括TMB（四甲基聯(lián)苯胺）和ABTS（2,2'聯(lián)氮雙(3乙基苯并噻唑啉6磺酸)），它們在催化后會形成藍色或橙黃色產(chǎn)物。