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ELISA多抗和單抗的優(yōu)缺點比較
閱讀:353 發(fā)布時間:2015-2-12ELISA優(yōu)點展示:
1. 克隆抗體可有助于放大低表達水平的靶蛋白信號,因為靶蛋白可在多個表位上結(jié)合不止一個抗體分子。但是這會給定量實驗造成不利影響,因為結(jié)果將變得不準確。
2. 由于能識別多個表位,多克隆抗體可在IP/ChIP中得到更好的結(jié)果。
3. 比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。
4. 它們會識別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì),或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白,例如當(dāng)未測試物種中的抗原性質(zhì)未知時,有時會使用多克隆抗體。這也使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。
5. 多克隆抗體通常是檢測變性蛋白質(zhì)的。
6. 多表位通常可提供更為有力的檢測。
7. 多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因為抗血清通常可識別多個結(jié)構(gòu)域。
不足之處:
·易于產(chǎn)生批次間差異。
·產(chǎn)生大量非特異性抗體,有時可能在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號。
·多表位使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。
客觀事實:
1. 識別任一抗原上的多個表位。獲得的血清將包含不同親和力抗體的異質(zhì)復(fù)合體混合物。
2. 多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。
3. 肽免疫原通常用于產(chǎn)生靶向*表位的多克隆抗體,特別適合高同源性的蛋白家族。
抗體制備:
1. 制備成本低廉。
2. 制備所需技術(shù)和技能不高。
3. 制備時間短。
4. 多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因為多克隆抗血清通??勺R別多個結(jié)構(gòu)域。