ELISA試劑盒嘌呤霉素(puromycin;PM ) 是一種蛋白質(zhì)合成抑制劑,它具有與tRNA分子末端類似的結(jié)構(gòu)，能夠同氨基酸結(jié)合，代替氨?；膖RNA同核糖體的A位點結(jié)合，并摻入到生長的肽鏈中。用嘌呤霉素篩選細(xì)胞方法如下：
嘌呤霉素篩選細(xì)胞
轉(zhuǎn)染（24孔板進(jìn)行）或電轉(zhuǎn)后培養(yǎng)24小時，按10%密度傳代（傳至36mm平皿），繼續(xù)培養(yǎng)24小時，待細(xì)胞密度增至20%-25%回合時；
去掉培養(yǎng)液，PBS洗一次，加入按照*嘌呤霉素篩選細(xì)胞的濃度（殺傷曲線試驗確定）配制好的嘌呤霉素篩選細(xì)胞培養(yǎng)基2-3ml。
根據(jù)培養(yǎng)基的顏色和細(xì)胞的存活情況，每隔2天更換一次嘌呤霉素篩選細(xì)胞用培養(yǎng)基（培養(yǎng)基用量為2-4ml，細(xì)胞多，多家培養(yǎng)基，細(xì)胞少，少加培養(yǎng)基），一般在3-1天內(nèi)出現(xiàn)細(xì)胞大量或少量死亡情況（如果轉(zhuǎn)染效率或電轉(zhuǎn)效率高，則死亡少；如果轉(zhuǎn)染率或電轉(zhuǎn)率低，則死亡多；如果篩選濃度偏低，嘌呤霉素篩選細(xì)胞培養(yǎng)基用量少，細(xì)胞密度大于80%，會導(dǎo)致大量假陽性克隆）。如果少選*周，出現(xiàn)細(xì)胞大量死亡，則在原培養(yǎng)皿中繼續(xù)加入嘌呤霉素篩選細(xì)胞培養(yǎng)基篩選一周；如果刪選*周，出現(xiàn)細(xì)胞少量死亡，則把細(xì)胞按照10%密度傳代（傳至35mm平皿，傳一個皿即可，多余細(xì)胞丟棄），利用少選培養(yǎng)基進(jìn)行篩選一周；
篩選第二周結(jié)束后，則把細(xì)胞消化下來。進(jìn)行重點稀釋（10ul培養(yǎng)基中含1個細(xì)胞，用篩選培養(yǎng)基），把上述10ul細(xì)胞懸液假日96孔板中（提前加入40ul篩選培養(yǎng)基），伊紅加入24孔，4小時候觀察每個孔的情況。記錄只含一個細(xì)胞的孔，含有一個細(xì)胞的孔用于繼續(xù)篩選，其余孔舍棄；
根據(jù)培養(yǎng)基的顏色和細(xì)胞生長情況換入新的嘌呤霉素篩選細(xì)胞用培養(yǎng)基待細(xì)胞密度為80%時，將其傳代至24孔板中增殖，待細(xì)胞密度為80%時，將其傳代至6孔板中增殖，待細(xì)胞密度為80%時，將其傳代至T25瓶（一傳3）中增殖，每隔3天換液。
細(xì)胞大量擴增后，一瓶用于提取中RNA進(jìn)行QPCR檢測，一瓶用于總蛋白進(jìn)行WB檢測，另一瓶用于保種，根據(jù)QPCR和WB結(jié)果取舍陽性克隆。
嘌呤霉素篩選細(xì)胞方法如上，具體的嘌呤霉素篩選細(xì)胞讓發(fā)如上，嘌呤霉素穩(wěn)定性高，可以常溫運輸，收到產(chǎn)品后4℃存放；
嘌呤霉素在室溫條件下可存放3個月，4℃條件下保質(zhì)期一年。為了達(dá)到的穩(wěn)定狀態(tài)和zui長的保質(zhì)期，存放于-20°C，保質(zhì)期為2年。

BAMBI    腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體
BCL9    B淋巴細(xì)胞淋巴瘤因子9抗體
Biliverdin Reductase    膽綠素還原酶抗體
BIVM    BIVM蛋白抗體
Blood Group Lewis a    血型Lewis A抗原抗體
Blood Group Lewis b    粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體
BLM    Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體
BMP8b    骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體
phospho-BMX (Tyr566)    磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體
phospho-BNIP3 (Ser95)    磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體
BOB1    B淋巴細(xì)胞特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體

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