詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 血小板糖蛋白GPIb抗體 |
英文名稱 | CD42b |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
海蘇特氏菌 Jooslamarina
嗜鹽四聯(lián)球菌 Tetragecoccushalophilus
空腸彎曲桿菌 Campylobacterfetussubsp.jejuni
Massiliaconsociate Massiliaconsociate
Naxibactervarians Naxibactervarians
明亮發(fā)光? .. Photobacteriumphosphoreum
木醋桿菌 Acetobacter xylinum=Gluconacetobacter xylinus
宋氏志賀氏菌 Shigellasonnei
朝鮮芽孢八疊球菌 Sporosarcinakoreensis
泛養(yǎng)副球菌 Paracoccuspantotrophus
心鈉肽(ANP)ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)規(guī)格:48T/96T
親環(huán)素B(CYPB)ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB)規(guī)格:48T/96T
組蛋白H2A(H2A)ELISA Kit for Histone H2A (H2A)規(guī)格:48T/96T
彈性蛋白(ELN)ELISA Kit for Elastin (ELN)規(guī)格:48T/96T
胃動素(MTL)ELISA Kit for Motilin (MTL)規(guī)格:48T/96T
生長激素(GH)ELISA Kit for Growth Hormone (GH)規(guī)格:48T/96T
L選擇素(SELL)ELISA Kit for Selectin, Leukocyte (SELL)規(guī)格:48T/96T
間隙連接蛋白43(CX43)ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)規(guī)格:48T/96T
E選擇素(SELE)ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)狀腺素蛋白(TTR)ELISA Kit for Transthyretin (TTR)規(guī)格:48T/96T
過氧化酶(CAT)ELISA Kit for Catalase (CAT)規(guī)格:48T/96T
緊密連接蛋白1(TJP1)ELISA Kit for Tight Junction Protein 1 (TJP1)規(guī)格:48T/96T
血小板糖蛋白GPIb抗體糖基轉(zhuǎn)移酶25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體(+)-Noe's reagent別名: 分子式: C24H38O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
糖基轉(zhuǎn)移酶28家族1抗體1,2-Bis(3-indenyl)ethane別名: 分子式: C20H18性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
糖基轉(zhuǎn)移酶6結(jié)構(gòu)1抗體(R,R)-2,6-Bis(4-isopropyl-2-oxazolin-2-yl)pyridine別名: 分子式: C17H23N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體(R,R)-2,6-Bis(4-phenyl-2-oxazolin-2-yl)pyridine別名: 分子式: C23H19N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
磷化糖皮質(zhì)激素受體抗體Bis(carboxymethyl) trithiocarbona別名: 分子式: C5H6O4S3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol別名: 分子式: C24H26O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
糖皮質(zhì)激素受體β抗體2-Benzoylacetanilide別名: 分子式: C15H13NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
胰島葡萄糖6磷酶2抗體trans,trans-Bis(4-fluorobenzal)acetone別名: 分子式: C17H12F2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: