詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 20號染色體開放閱讀框4抗體 |
英文名稱 | C20orf4 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
維生素K3標準品Rat PPAR-γ ELISA Kit純度:0.993
美昔康標準品Rat Cystatin C ELISA Kit純度:0.999
美侖孕醋酯標準品Rat Cystatin C ELISA Kit純度:0.994
褪黑素標準品Rat CrossLaps ELISA Kit純度:0.993
葡甲標準品Rat CrossLaps ELISA Kit純度:0.962
醋甲地孕標準品Rat Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit純度:0.997
甲喹相關(guān)物質(zhì)A標準品Rat Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit純度:0.99
Rabbit Thrombin activatable fibrilysis inhibitor,TAFI ELISA Kit兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T≥95%Asarinin細辛素規(guī)格:
Rabbit Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T95%Schaftoside夏佛塔苷規(guī)格:
Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T98%curculigoside仙茅苷規(guī)格:
Rabbit nitric oxide, ELISA Kit 兔一氧化氮()ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T98%Adesine腺苷規(guī)格:
Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T95%alpha-Methyl-L(+)-tryptophan相思豆堿規(guī)格:
Rabbit Substance P,SP ELISA Kit兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T98%Vanillic acid香草酸規(guī)格:
20號染色體開放閱讀框4抗體10mg細胞過濾篩 50目7724-76-72061-64-596T凋亡誘導子(AIF)HPLC≥98%17-α-羥化酶檢測試劑盒5mgADAMTS481-93-6化學試劑腎酶(RNLS)50mg細胞過濾篩 60目59756-60-41859-87-696T凋亡誘導子(AIF)HPLC≥98%16α羥雌1檢測試劑盒5mgOPGL2609-88-3化學試劑γ-內(nèi)啡肽(γEP)
50mg細胞過濾篩 60目59756-60-41859-87-696T凋亡誘導子(AIF)HPLC≥98%16α羥雌1檢測試劑盒5mgOPGL2609-88-3化學試劑γ-內(nèi)啡肽(γEP)ea細胞過濾篩 70目56425-91-3115458-73-696T粘蛋白5B(MUC5B)HPLC≥98%15-羥前列腺素脫酶檢測試劑盒5mgON2609-88-3化學試劑低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP5)
ea細胞過濾篩 70目56425-91-3115458-73-696T粘蛋白5B(MUC5B)HPLC≥98%15-羥前列腺素脫酶檢測試劑盒5mgON2609-88-3化學試劑低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP5)25mg細胞過濾篩 80目1071-83-6137941-45-896T催素(PRL)HPLC≥98%15-epi-脂素 A4檢測試劑盒5mgHAV3564-18-9化學試劑抗原肽轉(zhuǎn)運蛋白1(TAP1)
25mg細胞過濾篩 80目1071-83-6137941-45-896T催素(PRL)HPLC≥98%15-epi-脂素 A4檢測試劑盒5mgHAV3564-18-9化學試劑抗原肽轉(zhuǎn)運蛋白1(TAP1)25mg細胞過濾篩 100目1071-83-621887-01-496T蛋白酪酶受體N(PTPRN)HPLC≥98%14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測試劑盒5mgHDV3564-18-9化學試劑心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)
25mg細胞過濾篩 100目1071-83-621887-01-496T蛋白酪酶受體N(PTPRN)HPLC≥98%14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測試劑盒5mgHDV3564-18-9化學試劑心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)100mg細胞過濾篩 120目21087-64-9486-39-596T親環(huán)素B(CYPB)HPLC≥98%12-脂化酶/脂加酶檢測試劑盒5mgHSVI3564-18-9化學試劑Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)