詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | CCZ1蛋白抗體 |
英文名稱 | CCZ1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA試劑盒Pioglitazone HCl>98.5%
Human dengue fever antibody,DF ELISA試劑盒Pioglitazone HClHPLC>98%,標準品
Human Deoxypyridiline crosslinks,DPD ELISA試劑盒Pizotifen Malate>98.5%,BR
Human deoxypyridiline,DPD ELISA試劑盒Pizotifen Malate>98.5%,BR
Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISA試劑盒Polymyxin B Sulfate>6500 IU/mg,USP30
Human deoxyribonucleic protein antibody,DNP-Ab ELISA試劑盒Polymyxin B Sulfate>6500 IU/mg,USP30
Human deoxyuridinetriphate,DUTP ELISA試劑盒Polymyxin B Sulfate>6500 IU/mg,USP30
Human dermatan sulfate,DS ELISA試劑盒Polymyxin B Sulfate>6500 IU/mg,USP30
Human dermato-pontin,DPT ELISA試劑盒Polymyxin B Sulfate含量測定
Human desmin,Des ELISA試劑盒Pramlintide Acetate純度≥98.0%
Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA試劑盒Pramlintide Acetate純度≥98.0%
Human Desmopressin/1-desami-8-D-arginine vasopressin,dDAVP ELISA試劑盒Pravastatin Sodium HPLC>98%,標準品
Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISA試劑盒Pravastatin Sodium >98%
Human diamine oxidase,DAO ELISA試劑盒 Pravastatin Sodium >98%
Human Dickkopf 1,DKK1 ELISA試劑盒Prednisolone>98.5%,USP/BP
CCZ1蛋白抗體1ml一次性比色皿 12.5×12.5×45mm 134678-17-4288847-34-796T半糖苷酶β(GLβ)HPLC≥98%諾龍/去睪檢測試劑盒20mgMIP51503-28-7化學試劑肝型脂肪結(jié)合蛋白(FABP1)25mg比色皿 玻璃 5mm 1.7mL186826-86-8205370-59-896T脫核糖核酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)HPLC≥98%本周蛋白檢測試劑盒20mgBrucla Ab IgG89453-69-0化學試劑載脂蛋白A4(APOA4)
25mg比色皿 玻璃 5mm 1.7mL186826-86-8205370-59-896T脫核糖核酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)HPLC≥98%本周蛋白檢測試劑盒20mgBrucla Ab IgG89453-69-0化學試劑載脂蛋白A4(APOA4)500mg比色皿 玻璃 10mm 3.5mL186826-86-8218600-53-496T谷轉(zhuǎn)酶(ALT)HPLC≥98%胞質(zhì)動力蛋白檢測試劑盒10mgBrucla Ab IgM89453-69-0化學試劑蛋白1(MMRN1)
500mg比色皿 玻璃 10mm 3.5mL186826-86-8218600-53-496T谷轉(zhuǎn)酶(ALT)HPLC≥98%胞質(zhì)動力蛋白檢測試劑盒10mgBrucla Ab IgM89453-69-0化學試劑蛋白1(MMRN1)1.2ml×3ampules比色皿 玻璃 20mm 7mL151096-09-2228851-54-596T激酶(PK)HPLC≥98%胞外超化物歧化酶檢測試劑盒20mgα-N-Ace68025-25-2化學試劑脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)
1.2ml×3ampules比色皿 玻璃 20mm 7mL151096-09-2228851-54-596T激酶(PK)HPLC≥98%胞外超化物歧化酶檢測試劑盒20mgα-N-Ace68025-25-2化學試劑脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)200mg比色皿 玻璃 30mm 10.5mL151096-09-2850728-18-696T補體1抑制子(C1INH)HPLC≥98%胞漿型脂酶A2-α檢測試劑盒20mgVDBP68025-25-2化學試劑羧肽酶N2(CPN2)
200mg比色皿 玻璃 30mm 10.5mL151096-09-2850728-18-696T補體1抑制子(C1INH)HPLC≥98%胞漿型脂酶A2-α檢測試劑盒20mgVDBP68025-25-2化學試劑羧肽酶N2(CPN2)300mg比色皿 玻璃 40mm 14mL152-11-4179067-42-696T補體成分3a受體1(C3aR1)HPLC≥98%包蟲抗體IgG 試劑盒20mgTSPAN1456-27-9化學試劑谷光甘肽合成酶(GSS)