詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 4號染色體開放閱讀框40抗體 |
英文名稱 | C4orf40 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
冰核細菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
陰溝腸桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
產(chǎn)氣腸桿菌保存,ATCC菌株
痢疾志賀氏菌售價,ATCC菌株
宋氏志賀氏菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
普雷恩毛霉培養(yǎng),ATCC菌株
立枯多核菌保存,ATCC菌株
大腸桿菌售價,ATCC菌株
原鈣黏素β14(PCDHβ14)ELISA Kit for Protocadherin Beta 14 (PCDHb14)規(guī)格:48T/96T
胎盤膠原凝集素1(CLP1)ELISA Kit for Collectin Placenta 1 (CLP1)規(guī)格:48T/96T
剪接因子1(SF1)ELISA Kit for Splicing Factor 1 (SF1)規(guī)格:48T/96T
羧肽酶N2(CPN2)ELISA Kit for Carboxypeptidase N2 (CPN2)規(guī)格:48T/96T
突觸融合蛋白16(STX16)ELISA Kit for Syntaxin 16 (STX16)規(guī)格:48T/96T
N-酰轉移酶6(NAT6)ELISA Kit for N-Acetyltransferase 6 (NAT6)規(guī)格:48T/96T
卷曲同源物1(FZD1)ELISA Kit for Frizzled Homolog 1 (FZD1)規(guī)格:48T/96T
輸入蛋白13(IPO13)ELISA Kit for Importin 13 (IPO13)規(guī)格:48T/96T
連接蛋白3(JPH3)ELISA Kit for Junctophilin 3 (JPH3)規(guī)格:48T/96T
蛋白O-甘露糖基轉移酶2(POMT2)ELISA Kit for Protein O-Mansyltransferase 2 (POMT2)規(guī)格:48T/96T
腺苷裂解酶(ADSL)ELISA Kit for Adenylosuccinate Lyase (ADSL)規(guī)格:48T/96T
CopineⅦ蛋白(CPNE7)ELISA Kit for Copine VII (CPNE7)規(guī)格:48T/96T
4號染色體開放閱讀框40抗體100mg谷胱甘肽過化物酶(GPX)檢測試劑盒 紫外分光光度法68207-00-160137-06-696T表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)HPLC≥98%幾質酶3樣蛋白1檢測試劑盒20mgOmentin-177-06-5化學試劑亞精合酶(SRM)50樣中六價離子(Cr6+)濃度檢測試劑盒 可見分光光度法68207-00-150298-90-396T表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)HPLC≥98%幾質酶1檢測試劑盒20mgMAP-277-06-5化學試劑法尼轉移酶α(FNTα)
50m樣中六價離子(Cr6+)濃度檢測試劑盒 可見分光光度法68207-00-150298-90-396T表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)HPLC≥98%幾質酶1檢測試劑盒20mgMAP-277-06-5化學試劑法尼轉移酶α(FNTα)20水樣中六價離子(Cr6+)濃度檢測試劑盒 微量法9005-64-577-53-296T表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)HPLC≥98%集蛋白亞家族成員11檢測試劑盒20mgmicroRNA77-06-5化學試劑類脂肪酶A(LPHA)
20樣中六價離子(Cr6+)濃度檢測試劑盒 微量法9005-64-577-53-296T表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)HPLC≥98%集蛋白亞家族成員11檢測試劑盒20mgmicroRNA77-06-5化學試劑類脂肪酶A(LPHA)25mg羧酯酶(CarE)活性檢測試劑盒 可見分光光度法9005-66-72447-54-396T狀旁腺素受體2(PTHR2)HPLC≥98%極低密度脂蛋白檢測試劑盒20mgVA化學試劑脂素1(LPIN1)
25mg羧酯酶(CarE)活性檢測試劑盒 可見分光光度法9005-66-72447-54-396T狀旁腺素受體2(PTHR2)HPLC≥98%極低密度脂蛋白檢測試劑盒20mgVA化學試劑脂素1(LPIN1)50mg羧酯酶(CarE)活性檢測試劑盒 微量法9005-67-8400603-95-496T狀旁腺素受體2(PTHR2)HPLC≥98%激肽釋放酶8檢測試劑盒20mgVB1化學試劑脂素2(LPIN2)
50mg羧酯酶(CarE)活性檢測試劑盒 微量法9005-67-8400603-95-496T狀旁腺素受體2(PTHR2)HPLC≥98%激肽釋放酶8檢測試劑盒20mgVB1化學試劑脂素2(LPIN2)200mg土壤性蛋白酶活性檢測試劑盒9005-71-4125536-25-696T蛋白激酶Cε(PKCε)HPLC≥98%激肽釋放酶7檢測試劑盒20mgVB12化學試劑脂素3(LPIN3)