磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體

抗體制備過程：
1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體，抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品，產(chǎn)品品質(zhì)，價格實惠，多種規(guī)格供應(yīng)，售后完善。

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù)：
（一）原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
唑螨(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%純度：≥98%

精乙基噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%純度：≥98%

Amberlite® IRC748螯合型離子交換樹脂   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：純度：≥97%

Amberlyst15離子交換樹脂(濕)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：濕純度：≥98%

Amberlyst 15離子交換樹脂(干)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：干純度：≥98%

Amberlite® IRA900 陰離子交換樹脂   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：純度：≥98%

Amberlite® XAD16非離子型大孔樹脂(2060 mesh)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：2060 mesh純度：≥99%

殺螟丹(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%純度：≥90%

殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：100μg/ml,u=3%純度：≥90%

殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：10μg/ml,u=3%純度：≥98%

莎稗(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%純度：≥98%

Amberlite® IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級凝膠強堿Ⅱ型陰離子交換樹脂)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：719(202)是高等級凝膠強堿Ⅱ型陰離子交換樹脂純度：≥98%

二銨（分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定法測定,≥99.5%）   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定法測定,≥99.5%純度：≥98%

二銨(for HPLC,≥99.0%(T))   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：for HPLC,≥99.0%(T)純度：≥95%

Amberlite XAD7HP 離子交換樹脂(Mesh 2060)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：Mesh 2060純度：≥96%

Amberlite XAD4 非離子型大孔樹脂(粒徑0.49  0.69 mm)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：粒徑0.49  0.69 mm純度：≥96%

γCatenin  γ連環(huán)素/連接蛋白γ一抗    * 0.2ml TetrahydroLBiopterin free base

Thrap3/TRAP150  狀腺激素受體相關(guān)蛋白3一抗    * 0.2ml Tirofiban HCl

PRMT5  組蛋白精氨基轉(zhuǎn)移酶5一抗    * 0.2ml Tirofiban HCl

ELL2  聚合酶延伸因子2一抗    * 0.2ml Pullulan

Escherichka coli K88K99/ETECK88  豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿K88K99一抗    * 0.2ml Vitamin E,dlαtocopherol

CSTF2T/CstF64  細胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64一抗    * 0.2ml Stavudine

OGlcNAc transferase  O位N乙酰葡萄糖OGT一抗    * 0.2ml Stavudine

SAP62  剪接體相關(guān)蛋白62一抗    * 0.2ml Moclobemide
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體Nagilactone C中文名：別名：分子式：C19H22O7

蛋白激酶GCN2蛋白抗體Jolkil A中文名：別名：分子式：C29H36O6

生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體Euphorbia factor L3中文名：別名：分子式：C31H38O7

磷酸化生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體Gopherenediol中文名：別名：分子式：C20H34O2

磷酸化糖原合酶激酶3α抗體 GSK3α(Phospho-Ser21)Gelomulide A中文名：別名：分子式：C22H30O5