詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 血管緊張素Ⅱ受體1抗體 |
英文名稱 | AT2R |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
羌活英文名稱:topterygium保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1一抗
何首烏英文名稱:Polygonum multiflorum保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g酯酶Cβ1一抗
佛手英文名稱:Bergamot保存:20℃,避光規(guī)格:1gPRPF4蛋白一抗
蒼術(shù)(茅蒼術(shù))英文名稱:(Atractylodes lancea)保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g果膠酶一抗
蘇合香英文名稱:Storax保存:20℃,避光規(guī)格:1ml青霉素G一抗
關(guān)木通(東北馬兜鈴)英文名稱:Guan Mutong (Aristolochia contorta)保存:20℃,避光規(guī)格:1.0g蛋白酶體PSMα3一抗
伊貝母(新疆貝母)英文名稱:Siberian Fritillary (Fritillaria Xinjiang)保存:20℃,避光規(guī)格:5g蛋白酶體PSMD3一抗
延胡索英文名稱:Yan Husuo保存:20℃,避光規(guī)格:1g蛋白酶體PRS10B一抗
當(dāng)歸英文名稱:Chinses Angelica保存:20℃,避光規(guī)格:0.6g腦蛋白4一抗
三油甘油英文名稱:Three oleic acid glyceride保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化蛋白酶體PSMα3一抗
賴英文名稱:Lysine保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白酶體PRS7一抗
阿魏鈉英文名稱:Sodium ferulate保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白酶體PSMα1一抗
阿奇英文名稱:Azithromycin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 100mg/支蛋白酶體PSMα2一抗
畢靈英文名稱:Bicuculline保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白酶體PSMα6一抗
β桉葉;β桉英文名稱:Beta eudesmol; beta eudesmol保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白酶體PSMα7一抗
百蕊草素I、阿福豆苷;山柰3葡萄糖英文名稱:Thesine I, Fu soybean glycosides of kaempferol 3 glucose;保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支NADPH氧化酶活化蛋白p47一抗
別隱品、Α別隱品英文名稱:The allocryptopine, alpha allocryptopine保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支成對樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2一抗
血管緊張素Ⅱ受體1抗體DHT(Human Dihydrotestosterone) 檢測試劑盒 雙氫睪酮* 規(guī)格: 48T/96T
DHT 檢測試劑盒 雙氫睪酮* 規(guī)格: 48T/96T
DHEA-S7(Mouse Dehydroepiandrosterone S7) 檢測試劑盒 脫氫表雄酮S7* 規(guī)格: 48T/96T
DHEA-S7(Human Dehydroepiandrosterone S7) 檢測試劑盒 脫氫表雄酮S7* 規(guī)格: 48T/96T
DHEA-S7 檢測試劑盒 脫氫表雄酮S7* 規(guī)格: 48T/96T
DHEA(Mouse Dehydroepiandrosterone) 檢測試劑盒 脫氫表雄酮* 規(guī)格: 48T/96T
DHEA(Human Dehydroepiandrosterone) 檢測試劑盒 脫氫表雄酮* 規(guī)格: 48T/96T