詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產品名稱 | 20號染色體開放閱讀框187抗體 |
英文名稱 | C20orf187 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
己孕標準品Rat AGRP ELISA Kit純度:0.99
氫醌標準品Rat 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA KIT純度:0.98
氫甲噻標準品Rat 8-iso-Prostaglandin F2a純度:0.998
雙氫噻嗪標準品Rat 8-hydroxy-2-deoxyguasine ELISA Kit純度:0.989
白毛莨堿標準品Rat Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit純度:0.999
鹽肼屈嗪標準品Rat Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit純度:0.999
絨毛膜促性激素標準品Rat 25(OH)D3 ELISA KIT純度:0.999
Duck Immuglobulin E,IgE ELISA Kit鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測定醋酸地孕酮規(guī)格:100mg
Duck major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit 鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測定睪酮 規(guī)格:100mg
Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit 鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測定布美他尼規(guī)格:100mg
Duck Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 進口/原裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光檢查用氨環(huán)酸規(guī)格:50mg
Duck Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T常溫,避光檢查用胡椒規(guī)格:50mg
Duck Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測定谷胺規(guī)格:50mg
20號染色體開放閱讀框187抗體100mg透析袋 即用型 扁寬31 截留分子量500-100023670-94-296T載脂蛋白A2(APOA2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原肽檢測試劑盒5mgALP5290-62-0化學試劑TNF受體關聯(lián)子5(TRAF5)25mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量8000570-72-996T載脂蛋白B(APOB)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原末端肽檢測試劑盒5mgSE5290-62-0化學試劑Toll樣受體銜接分子1(TICAM1)
25mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量8000570-72-996T載脂蛋白B(APOB)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原末端肽檢測試劑盒5mgSE5290-62-0化學試劑Toll樣受體銜接分子1(TICAM1)50mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量1000019716-26-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原端肽檢測試劑盒5mgSE485-47-2化學試劑TANK結合激酶1(TBK1)
50mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量1000019716-26-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原端肽檢測試劑盒5mgSE485-47-2化學試劑TANK結合激酶1(TBK1)10mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量112244-29-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原C端肽檢測試劑盒5mgIL-39485-47-2化學試劑V-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌同源物(MAF)
10mg透析袋 即用型 扁寬32 截留分子量0112244-29-896T多巴受體D2(DRD2)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原C端肽檢測試劑盒5mgIL-39485-47-2化學試劑V-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌同源物(MAF)50mg透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量250006025-53-222149-69-596T多巴轉運蛋白(DAT)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原檢測試劑盒5mgGzms-A485-47-2化學試劑V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌同源物(KRAS)
50mg透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量250006025-53-222149-69-596T多巴轉運蛋白(DAT)HPLC≥98%Ⅲ型前膠原檢測試劑盒5mgGzms-A485-47-2化學試劑V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌同源物(KRAS)20mg透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量500006025-53-259092-94-396T腫瘤蛋白p53(TP53)HPLC≥98%Ⅲ型膠原蛋白檢測試劑盒5mgPF;PFP90-44-8化學試劑白介素18結合蛋白(IL18BP)