詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 1號染色體開放閱讀框105抗體 |
英文名稱 | C1orf105 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
亞油甲酯標準品Rat calcitonin gene related peptide ELISA Kit純度:0.999
月桂甲酯標準品Rat calcitonin gene related peptide ELISA Kit純度:0.987
甲基異基甲標準品Rat CT ELISA Kit純度:0.999
2-¤標準品Rat CT ELISA Kit純度:0.989
辛甲酯標準品Rat Thyroid Ab ELISA Kit純度:0.992
己甲酯標準品Rat Thyroid Ab ELISA Kit純度:0.998
癸甲酯標準品Rat T4 ELISA Kit純度:0.997
Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130442- /咪試劑規(guī)格:100g
Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130443- /對酰氨基醚規(guī)格:200mg
Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T130444- /庚磺酸鈉規(guī)格:5g
Rabbit soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA Kit兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒 進口/原裝規(guī)格:96T/48T130445- /戊磺酸鈉規(guī)格:5g
Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130446- /已磺酸鈉規(guī)格:5g
Rabbit Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130447-200501系統(tǒng)適應(yīng)性3-氧基-4-羥基醛規(guī)格:100mg
1號染色體開放閱讀框105抗體10mg手套 一次性無PVC手套 10盒/箱 大號72218-68-9165338-27-296T脂酰肌醇特異性酯酶Cβ3(PLCβ3)HPLC≥98%CC趨化子受體7檢測試劑盒20mgBACE14196-99-0化學(xué)試劑含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)50mg蘆薈膠手套72218-68-9165338-28-396T糖脂酰肌醇(GPI)HPLC≥98%CC趨化子受體5檢測試劑盒20mgKA4196-99-0化學(xué)試劑類固醇5α還原酶2(SRD5α2)
50mg蘆薈膠手套72218-68-9165338-28-396T糖脂酰肌醇(GPI)HPLC≥98%CC趨化子受體5檢測試劑盒20mgKA4196-99-0化學(xué)試劑類固醇5α還原酶2(SRD5α2)20mg蘆薈膠手套5536-17-4118627-52-496T胸腎表達趨化子(BRAK)HPLC≥98%CC趨化子受體2檢測試劑盒20mgEBV-Ab4196-99-0化學(xué)試劑含SET域蛋白7(SETD7)
20mg蘆薈膠手套5536-17-4118627-52-496T胸腎表達趨化子(BRAK)HPLC≥98%CC趨化子受體2檢測試劑盒20mgEBV-Ab4196-99-0化學(xué)試劑含SET域蛋白7(SETD7)20mg手套 無膠手套 光明 小號 國產(chǎn) 20盒/箱5536-17-452389-15-896T皮膚T-細胞虜獲趨化子(CTACK)HPLC≥98%CC趨化子受體1檢測試劑盒20mgAMS4196-99-0化學(xué)試劑赫曼斯普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)
20mg手套 無膠手套 光明 小號 國產(chǎn) 20盒/箱5536-17-452389-15-896T皮膚T-細胞虜獲趨化子(CTACK)HPLC≥98%CC趨化子受體1檢測試劑盒20mgAMS4196-99-0化學(xué)試劑赫曼斯普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)15mg手套 無膠手套 光明 中號 國產(chǎn) 20盒/箱147-94-4476-70-096TD-二聚體(D2D)GC≥99%CC趨化子7 檢測試劑盒1gCCK-8 2303-01-7化學(xué)試劑絲蛋白酶50(PRSS50)
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