詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產品名稱 | 卷曲螺旋結構域蛋白22抗體 |
英文名稱 | CCDC22 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
非普拉宗英文名稱:Feprazone保存:20℃,避光規(guī)格:50mg黑色素瘤相關抗原B1一抗
楊酰英文名稱:Salicylamide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg黑色素瘤相關抗原B3一抗
鹽拉貝洛爾英文名稱:Labetalol hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg黑色素瘤相關抗原B6一抗
鹽嗎啉胍英文名稱:Moroxydine Hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg黑色素瘤相關抗原B2一抗
保泰松英文名稱:Phenylbutazone保存:20℃,避光規(guī)格:100mg黑色素瘤相關抗原B4一抗
無水二鈉英文名稱:Two sodium hydrogen phosphate anhydrous保存:20℃,避光規(guī)格:100mg黑色素瘤相關抗原C1一抗
溴東莨菪英文名稱:Scopolamine Methobromide保存:20℃,避光規(guī)格:50mg組蛋白酰轉移酶一抗(腦膜瘤表達抗原5)
鹽環(huán)侖特羅英文名稱:Ring Lun clenbuterol hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mg黑色素瘤相關抗原G1一抗(相關蛋白4)
鹽妥洛特羅英文名稱:Tulobuterol hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mg黑色素瘤相關抗原C2一抗
溴肽林英文名稱:Propantheline bromide保存:20℃,避光規(guī)格:50mg黑色素瘤抗原樣基因2一抗
檸檬英文名稱:Limonene保存:20℃,避光規(guī)格:200mg結核分枝桿菌Ag85B一抗
尿嘧啶英文名稱:Uracil保存:20℃,避光規(guī)格:50mg膜相關環(huán)指蛋白11一抗
替加氟英文名稱:Tegafur保存:20℃,避光規(guī)格:50mg化肌球蛋白輕鏈一抗
嗎多明英文名稱:Molsidomine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg肌球蛋白輕鏈1/3一抗
加蘭他敏英文名稱:Galanthamine保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支肌肉細胞特異性泛素蛋白連接酶1一抗
(+)兒茶素;兒茶素英文名稱:(+) catechin; catechin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支泛素蛋白連接酶一抗
表兒茶素英文名稱:Epicatechin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支鋅指蛋白801一抗
卷曲螺旋結構域蛋白22抗體125mgBL21(DE3) 感受態(tài)細胞 18883-66-4155801-00-696T角蛋白18(KRT18)HPLC≥98%低分子質量蛋白7/β型蛋白酶體9檢測試劑盒10mgNEP化學試劑Dachsous 1蛋白(DCHS1)25mgBL21(DE3)感受態(tài)細胞 18883-66-496T細胞外質糖蛋白(MEPE)HPLC≥98%登革熱抗體IgM檢測試劑盒10mgTU M2-PK化學試劑D2-羥二二酯脫酶(D2HGDH)
25mgBL21(DE3)感受態(tài)細胞 18883-66-496T細胞外質糖蛋白(MEPE)HPLC≥98%登革熱抗體IgM檢測試劑盒10mgTU M2-PK化學試劑D2-羥二二酯脫酶(D2HGDH)200mgBL21(DE3)pLysS受體菌64-75-5155521-46-396T周期素依賴性激酶4(CDK4)HPLC≥98%登革熱抗體檢測試劑盒10mgCA724化學試劑糖轉移酶14(CHST14)
200mgBL21(DE3)pLysS受體菌64-75-5155521-46-396T周期素依賴性激酶4(CDK4)HPLC≥98%登革熱抗體檢測試劑盒10mgCA724化學試劑糖轉移酶14(CHST14)200mgBL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 64-75-520380-11-496T殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)HPLC≥98%登革熱檢測試劑盒20mgCTA化學試劑Cystin 1蛋白(CYS1)
200mgBL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 64-75-520380-11-496T殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)HPLC≥98%登革熱檢測試劑盒20mgCTA化學試劑Cystin 1蛋白(CYS1)200mgBL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 64-75-573493-60-496T毒蕈型膽受體M5(CHRM5)HPLC≥98%的牛血清白蛋白檢測試劑盒10mgTNF-α化學試劑Cylicin 2蛋白(CYLC2)
200mgBL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 64-75-573493-60-496T毒蕈型膽受體M5(CHRM5)HPLC≥98%的牛血清白蛋白檢測試劑盒10mgTNF-α化學試劑Cylicin 2蛋白(CYLC2)15mgX-gal(20mg/mL)64-75-5943989-68-296T纖溶酶原(Plg)HPLC≥98%蛋白質二鍵異構酶檢測試劑盒20mgTNFAIP6化學試劑Cylicin 1蛋白(CYLC1)