詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 1號染色體開放閱讀框38抗體 |
英文名稱 | C1orf38 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
食苯芽孢桿菌 Bacillusbenzoevorans
托木爾假單胞菌 Pseudomonastuomuerensis
Sphingomonasjejuensis Sphingomonasjejuensis
Massilianamucuonensis Massilianamucuonensis
普通變形桿菌 Proteusvulgaris
鴨疫里默氏桿菌 Riemerellaanatipestifer
橙色粘球菌 Myxococcusfulvus
Massiliatieshanensis Massiliatieshanensis
遲緩愛德華氏菌 Edwardsiellatarda
腸沙門氏菌腸炎亞種 Salmonellaentericasubsp.enterica
圍滴蛋白1(PLIN1)ELISA Kit for Perilipin 1 (PLIN1)規(guī)格:48T/96T
外周鞘磷蛋白22(PMP22)ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22)規(guī)格:48T/96T
非受體型蛋白酪磷酶11(PTPN11)ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase, n Receptor Type 11 (PTPN11)規(guī)格:48T/96T
連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)ELISA Kit for Catenin Beta 1 (CTNNb1)規(guī)格:48T/96T
Ⅶ型膠原(COL7)ELISA Kit for Collagen Type VII (COL7)規(guī)格:48T/96T
甘酰tRNA合成酶(GARS)ELISA Kit for Glycyl tRNA Synthetase (GARS)規(guī)格:48T/96T
炭疽熱毒素受體2(ANTXR2)ELISA Kit for Anthrax Toxin Receptor 2 (ANTXR2)規(guī)格:48T/96T
P物質(zhì)(SP)ELISA Kit for Substance P (SP)規(guī)格:48T/96T
抗凝血酶(AT)ELISA Kit for Antithrombin (AT)規(guī)格:48T/96T
血小板激活因子(PAF)ELISA Kit for Plaet Activating Factor (PAF)規(guī)格:48T/96T
白介素10受體α(IL10Rα)ELISA Kit for Interleukin 10 Receptor Alpha (IL10Ra)規(guī)格:48T/96T
肪合酶(FASN)ELISA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN)規(guī)格:48T/96T
1號染色體開放閱讀框38抗體200mg灌胃針 小鼠灌胃針12號(直頭/彎頭)不銹鋼123-33-187-44-596T免疫球蛋白A(IgA)分析標(biāo)準(zhǔn)品α2-HS糖蛋白檢測試劑盒250mgHPV37247-10-2化學(xué)試劑δ樣蛋白1同源物(δLK1)250mg灌胃針 大鼠灌胃針16號(直頭/彎頭)不銹鋼123-33-134620-76-396T信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%α1微球蛋白/bikunin前體檢測試劑盒250mgCO531-55-5化學(xué)試劑重肽鐵蛋白(FTH)
250mg灌胃針 大鼠灌胃針16號(直頭/彎頭)不銹鋼123-33-134620-76-396T信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%α1微球蛋白/bikunin前體檢測試劑盒250mgCO531-55-5化學(xué)試劑重肽鐵蛋白(FTH)100mg灌胃針 大鼠灌胃針18號(直頭/彎頭)不銹鋼689-82-7 55297-95-596T信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子5A(STAT5A)HPLC≥98%α1性糖蛋白檢測試劑盒20mgTPS53092-85-6化學(xué)試劑線粒體鐵蛋白(FTMT)
100mg灌胃針 大鼠灌胃針18號(直頭/彎頭)不銹鋼689-82-7 55297-95-596T信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子5A(STAT5A)HPLC≥98%α1性糖蛋白檢測試劑盒20mgTPS53092-85-6化學(xué)試劑線粒體鐵蛋白(FTMT)200mg灌胃針 大鼠灌胃針20號(直頭/彎頭)不銹鋼140-22-7 1194-65-696T信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)99%α1抗胰糜蛋白酶檢測試劑盒5mlHPV-IgG53092-85-6化學(xué)試劑二價轉(zhuǎn)運蛋白1(DMT1)
200mg灌胃針 大鼠灌胃針20號(直頭/彎頭)不銹鋼140-22-7 1194-65-696T信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)99%α1抗胰糜蛋白酶檢測試劑盒5mlHPV-IgG53092-85-6化學(xué)試劑二價轉(zhuǎn)運蛋白1(DMT1)1.5ml×3ampules灌胃針 小鼠灌胃針12號(直頭/彎頭)銅頭140-22-7 122-11-296TToll樣受體2(TLR2)HPLC≥99%α1抗胰蛋白酶檢測試劑盒100mgandrogen1936-15-8化學(xué)試劑鐵反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2(IREB2)
1.5ml×3ampules灌胃針 小鼠灌胃針12號(直頭/彎頭)銅頭140-22-7 122-11-296TToll樣受體2(TLR2)HPLC≥99%α1抗胰蛋白酶檢測試劑盒100mgandrogen1936-15-8化學(xué)試劑鐵反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2(IREB2)250mg灌胃針 大鼠灌胃針16號(直頭/彎頭)銅頭140-22-7 127-56-096T骨鈣素(OC)GC≥98%α1防御素檢測試劑盒1mlGLNS1936-15-8化學(xué)試劑順烏頭酶1(ACO1)