詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | β淀粉樣肽(1-40)抗體 |
英文名稱 | beta Amyloid 1-40 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
化熒光素(>90.0%(HPLC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>90.0%(HPLC)純度:≥98%
2',7'二熒光素(>95.0%(HPLC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95.0%(HPLC)純度:≥98%
2,3二氨基(>98.0%(GC)(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)(T)純度:≥98%
溴菲啶(>95.0%(HPLC)(N)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N)純度:≥98%
7(二基氨基)4基(>95.0%(GC)(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95.0%(GC)(T)純度:≥98%
7(二基氨基)4三氟基(>97.0%(GC)(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(GC)(T)純度:≥98%
7(二乙基氨基)3羧(>98.0%(GC)(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)(T)純度:≥98%
6[4(二基氨基)基]3羧乙(>98.0%(HPLC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(HPLC)純度:≥98%
熒光素二鉀 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:熒光染料純度:≥97%
熒光素二乙(>98.0%(HPLC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(HPLC)純度:≥98%
7羥基3羧(>98.0%(HPLC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(HPLC)純度:98%
7二乙氨基4基(>98.0%(GC)(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)(T)純度:≥98%
基鈣黃綠素藍水合物[用于配位滴定銅時的指示劑] 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:用于配位滴定銅時的指示劑純度:≥98%
6,7亞二氧基4基3馬來酰亞(>98.0%(HPLC)(N)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)純度:≥95%
4基6,7亞基二氧代(>99.0 %(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格: >99.0 %(GC)純度:≥98%
7氧基3羧(>98.0%(GC)(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)(T)純度:≥98%
C2L C2家族樣蛋白一抗 * 0.2ml Rutin
PSRC1 富含脯氨/絲氨卷曲螺旋蛋白1一抗 * 0.2ml Rutin
Band3/CD233 紅細胞陰離子交換蛋白1一抗 * 0.2ml Neosperidin dihydrochalcone
ART4/CD297 二腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4一抗 * 0.2ml Neosperidin dihydrochalcone
B3GALNT1 β1,3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3一抗 * 0.2ml Oxymatrine
Blood Group Lewis a 血型抗原Lewis A一抗 * 0.2ml Oxymatrine
Cyclophilin F 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIF一抗 * 0.2ml Andrographolide
DAP3 死亡相關(guān)蛋白3一抗 * 0.2ml Andrographolide
β淀粉樣肽(1-40)抗體上皮細胞膜蛋白3抗體CTU Guanamine中文名:別名:分子式:C17H26N10O4
腸道病毒71型/手足口病病毒抗體Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] sulfone中文名:雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜別名:分子式:C16H18O6S
膜蛋白EVC2抗體Bis[4-(dimethylami)phenyl]methane中文名:雙[4-(二甲氨基)苯基]別名:分子式:C17H22N2
Emerin蛋白抗體4,4'-Bis(chloromethyl)biphenyl中文名:4,4'-雙(氯甲基)聯(lián)苯別名:分子式:C14H12Cl2
轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid中文名:2,2-二羥甲基丁酸別名:分子式:C6H12O4
Staphylococcus warneri分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 無機污染物抗性菌/抗二價錳Mn培養(yǎng)基: 472生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法