詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 隱花色素蛋白1抗體 |
英文名稱 | Cryptochrome 1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
低分子量肝素 抗fxa1151IU/支英文名稱:Low molecular weight heparin anti fxa1151IU/ support含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格: 抗fIIa424IU/支NADPH氧化酶2一抗
右旋糖酐分子量D2000英文名稱:Dextran molecular weight D2000含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g/支NADPH氧化酶活化蛋白1一抗
右旋糖酐分子量D8英文名稱:Dextran molecular weight D8含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g/支利鈉肽受體B一抗
右旋糖酐分子量D7英文名稱:Dextran molecular weight D7含量:≥ 98%保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g/支利鈉肽受體C一抗
氧普英文名稱:Metoclopramide保存:20℃,避光規(guī)格:100mgA型流感NS1一抗(神經(jīng)酶1)
六蜜英文名稱:Altretamine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg高度相似的細(xì)胞周期蛋白激酶NEK6一抗
右氧芬英文名稱:Propoxyphene napsylate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg9號染色體開放閱讀框156一抗
潑尼龍英文名稱:Methylprednisolone保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化細(xì)胞核因子一抗
琥珀潑尼龍英文名稱:Methylprednisolone succinate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化谷受體2A+2B一抗
伏格列波糖英文名稱:Voglibose保存:20℃,避光規(guī)格:100mg膜內(nèi)在蛋白D26一抗
地平英文名稱:Amlodipine mesylate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2一抗
碳鈣英文名稱:Calcium carbonate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化DNA修復(fù)蛋白NBS1一抗
鹽奈替芬英文名稱:Naftifine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg雄激素受體復(fù)合物相關(guān)蛋白/核受體相互作用蛋白一抗
格雷英文名稱:Clopidogrel Hydrogen Sulfate保存:20℃,避光規(guī)格:100mgSH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A一抗
曲昔匹特英文名稱:Troxipide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1一抗
汀英文名稱:Amifostine保存:20℃,避光規(guī)格:50mg螺旋環(huán)螺旋蛋白2一抗
富馬喹平英文名稱:Quetiapine fumarate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg細(xì)胞粘附分子3一抗(脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白3)
隱花色素蛋白1抗體20mg酰膽酯酶(AchE)活性檢測試劑盒 可見分光光度法68610-92-497682-44-596T中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)HPLC≥98%色素瘤活性抑制蛋白檢測試劑盒20mgAG 59-05-2化學(xué)試劑干擾素α17(IFNα17)200mg酰膽酯酶(AchE)活性檢測試劑盒 微量法15396-00-6220998-10-796T組蛋白H2B(H2B)HPLC≥98%色素瘤標(biāo)記物檢測試劑盒20mgNADHD2365-40-4化學(xué)試劑干擾素α16(IFNα16)
200mg酰膽酯酶(AchE)活性檢測試劑盒 微量法15396-00-6220998-10-796T組蛋白H2B(H2B)HPLC≥98%色素瘤標(biāo)記物檢測試劑盒20mgNADHD2365-40-4化學(xué)試劑干擾素α16(IFNα16)200mg胞漿異檸檬脫酶(ICDHc)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法15396-00-682159-09-996T維生素B9(VB9)HPLC≥98%色素瘤試劑盒20mgCOX III2365-40-4化學(xué)試劑干擾素α14(IFNα14)
200mg胞漿異檸檬脫酶(ICDHc)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法15396-00-682159-09-996T維生素B9(VB9)HPLC≥98%色素瘤試劑盒20mgCOX III2365-40-4化學(xué)試劑干擾素α14(IFNα14)100mg胞漿異檸檬脫酶(ICDHc)活性檢測試劑盒 微量法77-86-161849-14-796T骨粘連蛋白(ON)HPLC≥98%色素試劑盒20mgCOX IV2365-40-4化學(xué)試劑干擾素α13(IFNα13)
100mg胞漿異檸檬脫酶(ICDHc)活性檢測試劑盒 微量法77-86-161849-14-796T骨粘連蛋白(ON)HPLC≥98%色素試劑盒20mgCOX IV2365-40-4化學(xué)試劑干擾素α13(IFNα13)200mg線粒體異檸檬脫酶(ICDHm)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法77-86-133419-42-096T骨粘連蛋白(ON)HPLC≥98%核子κB抑制物激酶β檢測試劑盒20mgMFN24005-49-6化學(xué)試劑干擾素α10(IFNα10)
200mg線粒體異檸檬脫酶(ICDHm)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法77-86-133419-42-096T骨粘連蛋白(ON)HPLC≥98%核子κB抑制物激酶β檢測試劑盒20mgMFN24005-49-6化學(xué)試劑干擾素α10(IFNα10)100mg線粒體異檸檬脫酶(ICDHm)活性檢測試劑盒 微量法77-86-176-49-396T骨粘連蛋白(ON)GC≥98%核子κB抑制物激酶α檢測試劑盒0.2mlABCG14005-49-6化學(xué)試劑干擾素α8(IFNα8)