HEPES溶液

HEPES溶液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒 Anti-ATP4B Antibody旁瘤抗原MA1抗體
兔性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)試劑盒Anti-ATP2A2 Antibody大腦蛋白1抗體
兔趨化因子CCL4樣蛋白1(CCL4L1)試劑盒Anti-ATP7A Antibody核糖核酸結(jié)合蛋白2抗體
兔白介素12 p40(IL-12 p40)試劑盒Anti-ATP5M

產(chǎn)品分類：細胞培養(yǎng)

儲存條件  4℃,2個月

用途  培養(yǎng)基或其他用途  緩沖液,可以較長時間控制恒定的pH值

注意事項  未無菌處理。pH值根據(jù)客戶需要定制,可選范圍在pH6.8～8.0之間。-20℃可保存4～6個月。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

抗促狀腺受體抗體(TRAb)TRAb ELISA Kit腺相關(guān)病5 VP1抗體包裝5MG

抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit脂肪脫氫抗體包裝100g

抗Smith抗體(Sm)Sm ELISA Kit抗尿激1A抗體包裝25g

卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)CCDC80 ELISA Kit抗尿激受體1B抗體包裝5g

巨噬細胞移動因子(MIF)MIF ELISA Kit二磷腺苷核糖基化因子鳥核苷交換因子2抗體包裝1g

巨噬細胞移動抑制因子(MIF)MIF ELISA Kitα增強子結(jié)合蛋白1抗體包裝5g

巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)MIP-5 ELISA Kit脊髓小腦共濟失調(diào)10抗體包裝250mg

巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit蛋白激A錨定蛋白7抗體包裝1g

巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)MIP-3α/CCL20 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體12抗體包裝5g

巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)MIP-2 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體9抗體包裝25g

巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白4抗體包裝5g

巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)MIP-1β/CCL4 ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體包裝100g

巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP1α)MIP1α ELISA Kit高爾基復合體相關(guān)蛋白1抗體包裝25g

巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)MDC/CCL22 ELISA Kit乙酰羧化1ACCα抗體包裝100mg

巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)M-CSF ELISA Kit腺核苷轉(zhuǎn)運蛋白1、2、3、4抗體包裝1g

磷化蛋白激B抗體促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)L-685458是一種有效的淀粉樣β蛋白前體γ分泌抑制劑, IC50為17 nM,比作用于其他天冬酰蛋白選擇性高50-100倍。
HEPES溶液Collagen VI /FITC  熒光標記抗Ⅵ型膠原IgG磺草酮

Collagen VII /FITC  熒光標記抗Ⅶ膠原(Ⅶ型膠原)IgG煙嘧磺隆

Collagen X /FITC  熒光標記抗Ⅹ型膠原IgG煙嘧磺隆 95%

COX/FITC  熒光標記色c氧化IgG草甘膦 ，99.5%

COX-1/FITC  熒光標記前列腺氧化環(huán)化1IgG草甘膦

COX-2/FITC  熒光標記前列腺氧化環(huán)化2IgG草甘膦標準溶液0μg/ml,u=2%,溶劑:水

COX4I1/FITC  熒光標記色c氧化IV亞型1IgG草甘膦標準溶液μg/ml,u=2%,溶劑:水

COX7A2/FITC  熒光標記色c氧化COX7A2IgG草甘膦 ，99.9%