詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
可見分光光度法 | 50管/48樣 | AS6321179 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義:游離脂肪酸,也稱為非酯化脂肪酸,在與白蛋白結(jié)合的血漿中循環(huán)。動物血液中的游離脂肪酸 (FFA )含量是一項(xiàng)重要的生理生化指標(biāo)。血清中游離脂肪酸的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),游離脂肪酸的濃度會因?yàn)樘悄虿?、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病而上升。測定原理:用有機(jī)溶劑萃取FFA。含有FFA的有機(jī)液與三乙醇胺銅反應(yīng),在有機(jī)相中形成脂肪酸銅 (銅皂) FFA一Cu。Cu離子與顯色液反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物。反應(yīng)形成的顏色深淺與Cu離子濃度的關(guān)系符合朗伯一比爾定律,因此可利用此反應(yīng)進(jìn)行比色。自備的儀器和用品:可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
糯稻根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chlortoluron solutionG蛋白偶聯(lián)受體115抗體包裝1g
歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DiuronG蛋白偶聯(lián)受體10抗體包裝5g
歐夾竹桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clofentezineβ-葡萄糖腦苷脂抗體包裝1g
歐前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fenuron半乳糖凝集相關(guān)蛋白A抗體包裝250mg
藕節(jié)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Daminozide半乳糖凝集12抗體包裝5g
盤龍參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DEETγ基丁運(yùn)載蛋白3抗體包裝100g
螃蟹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TerbumetonGTPIMAP家族成員1抗體包裝25g
胖大海(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: ThifluzamideGTPIMAP家族成員2抗體包裝5g
佩蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TsumacideGTPIMAP家族成員3抗體包裝1g
蟛蜞菊內(nèi)脂;蟛蜞菊內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TerbuthylazineGTPIMAP家族成員4抗體包裝5g
披麻草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tri-tert-butylphosphineGTPIMAP家族成員5抗體包裝25g
枇杷葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TebufenpyradG蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體包裝5g
片姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-NaphthaleneacetamideGTPIMAP家族成員7抗體包裝1g
平貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: ThiaclopridGTPIMAP家族成員8抗體包裝25g
坡模-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯英文名: Tricyclazol solutionG蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體包裝5g
細(xì)腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品牛小腸堿性磷試劑盒沒食子酯;Propyl gallat
白靈菇Pleurotus│nebrodensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%牛奶過敏原特異性IgE抗體芒果苷;Mangiferin
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)牛兒基焦磷合試劑盒沒食子;Gallic acid
游離脂肪酸含量(FFA)測試盒50管/48樣朱紅鏈霉 3-喹啉H1N1流感IgA抗體Elisa
煙曲霉 (R)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮H1N1流感IgG抗體Elisa
越桔假絲酵母 反式-4-(4-基環(huán)己基)苯H1N1流感IgM抗體Elisa
巨孢毛霉 2-硝基-5-H3N2流感IgA抗體Elisa
兩型孢毛霉 2,4-二-5-甲氧基苯H3N2流感IgG抗體Elisa
扣囊復(fù)膜孢酵母 苯-2,5-二磺酸H3N2流感IgM抗體Elisa
黑曲霉 苯并-2-酸尿囊Elisa
大腸埃希 4-(Boc-氨基)吡啶半乳糖凝集3Elisa
枯草芽孢桿 BOC-D-3-(3-吡啶基)-嗅覺受體1J1Elisa
溜曲霉 2,6-二-4-吡啶奧曲肽Elisa
球孢白僵 Estradiol valerate整合α4β1Elisa
金針菇F5 2'-羥基苯酮羧肽A4Elisa
鼠李糖乳桿 替考寧酪蛋白激受體A4Elisa
膠囊青霉 4-羥基鄰苯二甲酸低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4抗體Elisa
深紅酵母 N-BOC-3-氨基環(huán)己泛結(jié)合E2Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。