詳細(xì)介紹
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 20號(hào)染色體開放閱讀框107抗體 |
英文名稱 | C20orf107 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
咪唑標(biāo)準(zhǔn)品RatCXCL16 ELISA Kit純度:0.993
異環(huán)磷酰標(biāo)準(zhǔn)品Rat CXCL12 ELISA Kit純度:0.992
苷標(biāo)準(zhǔn)品Rat CXCL10 ELISA Kit純度:0.81
鹽依達(dá)比星標(biāo)準(zhǔn)品Rat BLC-1/CXCL13 ELISA Kit純度:0.999
布芬標(biāo)準(zhǔn)品Rat BLC-1/CXCL13 ELISA Kit純度:0.996
伊班膦標(biāo)準(zhǔn)品Rat BALP ELISA Kit純度:0.995
鄰二甲羥甲纖維素酯標(biāo)準(zhǔn)品Rat Aβ1-42 protein ELISA Kit純度:0.991
Rabbit Collagenase Type II ELISA Kit兔子膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T≥98%Coryline紫堇靈規(guī)格:
Rabbit Collagenase I ELISA Kit兔子膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T≥98%Paclitaxel紫杉醇規(guī)格:
Rabbit tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit 兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T≥95%(+)-Taxifolin紫杉葉素規(guī)格:
Rabbit Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA Kit兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T97%Shione紫菀酮規(guī)格:
Rabbit glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T≥98%ASTRAGALIN紫云英苷規(guī)格:
rabbit Tissue-type Plasimigen Actilyse,t-PA ELISA Kit兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T≥97%Palmic acid棕櫚酸規(guī)格:
20號(hào)染色體開放閱讀框107抗體15mg透析袋 MD77(8000-14000)D 美國(guó) 即用13730-98-8595-15-396TGDP解離抑制子1(GDI1)HPLC≥98%Alpha-D 生育/維生素E檢測(cè)試劑盒5mgFOLR521-31-3化學(xué)試劑蛋白酶體亞α1(PSMα1)15mg透析袋 MD10(8000-14000)D 美國(guó)94-75-7132951-90-796T二化酶(DAO)HPLC≥98%alpha-1能受體檢測(cè)試劑盒5mgGSTM1521-31-3化學(xué)試劑肌球蛋白重鏈4(MYH4)
15mg透析袋 MD10(8000-14000)D 美國(guó)94-75-7132951-90-796T二化酶(DAO)HPLC≥98%alpha-1能受體檢測(cè)試劑盒5mgGSTM1521-31-3化學(xué)試劑肌球蛋白重鏈4(MYH4)25mg透析袋 MD25(3500D ) 美國(guó)94-75-7142628-53-396T細(xì)胞間粘附分子5(ICAM5)HPLC≥98%AFG3樣蛋白2檢測(cè)試劑盒5mgACC521-31-3化學(xué)試劑肌球蛋白重鏈7(MYH7)
25mg透析袋 MD25(3500D ) 美國(guó)94-75-7142628-53-396T細(xì)胞間粘附分子5(ICAM5)HPLC≥98%AFG3樣蛋白2檢測(cè)試劑盒5mgACC521-31-3化學(xué)試劑肌球蛋白重鏈7(MYH7)20mg透析袋 MD25(7000D ) 美國(guó)94-75-7142628-54-496T血栓素B2(TXB2)HPLC≥98%Adropin檢測(cè)試劑盒5mgPKM230931-67-0化學(xué)試劑肌球蛋白重鏈6(MYH6)
20mg透析袋 MD25(7000D ) 美國(guó)94-75-7142628-54-496T血栓素B2(TXB2)HPLC≥98%Adropin檢測(cè)試劑盒5mgPKM230931-67-0化學(xué)試劑肌球蛋白重鏈6(MYH6)25mg透析袋 MD25(8000-14000)D 美國(guó)2702-72-9179388-53-596T激肽釋放酶10(KLK10)HPLC≥98%ADP-核糖化子5檢測(cè)試劑盒5mgSLE-IgG30931-67-0化學(xué)試劑5-羥色受體2A(HTR2A)
25mg透析袋 MD25(8000-14000)D 美國(guó)2702-72-9179388-53-596T激肽釋放酶10(KLK10)HPLC≥98%ADP-核糖化子5檢測(cè)試劑盒5mgSLE-IgG30931-67-0化學(xué)試劑5-羥色受體2A(HTR2A)25mg透析袋 MD34 ( 3500 D ) 美國(guó)2702-72-9179388-54-696T激肽釋放酶11(KLK11)HPLC≥98%ADP-核糖化子4檢測(cè)試劑盒5mgSLE-IgA30931-67-0化學(xué)試劑90kDa熱休克蛋白αB1(HSP90αB1)