詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 9號染色體開放閱讀框142抗體 |
英文名稱 | C9orf142 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
睪英文名稱:Testosterone propionate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg基質(zhì)金屬蛋白酶9一抗
芐氟噻嗪英文名稱:Bendroflumethiazide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白一抗
甘油三油英文名稱:Three oleic acid ester of glycerol保存:20℃,避光規(guī)格:0.15ml多藥耐藥相關(guān)蛋白1一抗
香荊芥英文名稱:Carvacrol保存:20℃,避光規(guī)格:0.15ml多藥耐藥相關(guān)蛋白2一抗
白果新(銀杏)英文名稱:Ginkgolic acid (Yin Xingsuan)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg線粒體核糖體蛋白L28一抗
β,β二酰阿卡寧英文名稱:Beta, beta two methyl acryloyl Akanin保存:20℃,避光規(guī)格:20mg錯配修復(fù)蛋白2一抗
天然冰片(右旋)英文名稱:Natural borneol (dextrobomeol)保存:20℃,避光規(guī)格:50mg褪黑素受體1A/松果體素受體1A一抗
牡荊素(牡荊苷)英文名稱:Vitexin (Mu Jinggan)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg髓樣分化蛋白一抗
溴檳榔英文名稱:Arecoline hydrobromide保存:20℃,避光規(guī)格:50mg粘蛋白2/上皮膜抗原2一抗
對二英文名稱:On two chlorobenzene保存:20℃,避光規(guī)格:100mg粘蛋白4一抗
檸檬英文名稱:Citric acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mgMYC結(jié)合蛋白2一抗
啡英文名稱:Caffeic acid ethyl ester保存:20℃,避光規(guī)格:50ml精/脯富含卷曲蛋白1一抗
正十五英文名稱:Are fifteen alkyl保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml微管相關(guān)蛋白9一抗
正十九英文名稱:Are nineteen alkyl保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1一抗
環(huán)英文名稱:Cyclohexane保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml結(jié)核分枝桿菌一抗
辛英文名稱:Octyl acetate保存:20℃,避光規(guī)格:0.5ml肌肉骨骼受體酪激酶一抗
脫卡維英文名稱:Dehydrogenation of Cavitin保存:20℃,避光規(guī)格:20mg膜相關(guān)環(huán)指蛋白1一抗
9號染色體開放閱讀框142抗體25mgpH試紙 pH0.5-5.020813-76-770578-24-496T肌紅蛋白(MYO)GC≥98%GTP酶NRas檢測試劑盒20mgPIIINP2243-76-7化學(xué)試劑趨化子C-C-元配體1(CCL1)25mgpH試紙 pH2.7-4.771672-86-1466-24-096T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%Gremlin-1蛋白檢測試劑盒100mgL-FABP2243-76-7化學(xué)試劑細(xì)胞外質(zhì)糖蛋白(MEPE)
25mgpH試紙 pH2.7-4.771672-86-1466-24-096T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%Gremlin-1蛋白檢測試劑盒100mgL-FABP2243-76-7化學(xué)試劑細(xì)胞外質(zhì)糖蛋白(MEPE)25mgpH試紙 pH8.2-1071672-86-163238-67-596T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%GDP解離抑制子2檢測試劑盒20mgD-LDH2243-76-7化學(xué)試劑淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)
25mgpH試紙 pH8.2-1071672-86-163238-67-596T干擾素β(IFNβ)HPLC≥98%GDP解離抑制子2檢測試劑盒20mgD-LDH2243-76-7化學(xué)試劑淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)25mgPH值標(biāo)準(zhǔn)(PH4.01)35908-31-796T足盂蛋白(PCX)HPLC≥98%GAD/IA2自身抗體試劑盒250mgL-LDH1718-34-9化學(xué)試劑含纈酪肽蛋白(VCP)
25mgPH值標(biāo)準(zhǔn)(PH4.01)35908-31-796T足盂蛋白(PCX)HPLC≥98%GAD/IA2自身抗體試劑盒250mgL-LDH1718-34-9化學(xué)試劑含纈酪肽蛋白(VCP)25mgPH值標(biāo)準(zhǔn)(PH4.01)35908-31-7509-20-696T前列腺抑制肽(PIP)HPLC≥98%G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1檢測試劑盒20mgTCR-Ab1718-34-9化學(xué)試劑神經(jīng)介素U(NMU)
25mgPH值標(biāo)準(zhǔn)(PH4.01)35908-31-7509-20-696T前列腺抑制肽(PIP)HPLC≥98%G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1檢測試劑盒20mgTCR-Ab1718-34-9化學(xué)試劑神經(jīng)介素U(NMU)25mgPH值標(biāo)準(zhǔn)(PH4.01)96T肝素酶(HPA)HPLC≥98%F-肌動蛋白檢測試劑盒5mgFLU-A1058-92-0化學(xué)試劑信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)