英文名稱：DyLight 594 Maleimide-Labeled Streptavidin
中文名稱：DyLight 594 馬來酰亞胺標(biāo)記鏈霉親和素

一、物質(zhì)概述

DyLight 594 MAL 鏈霉親和素是一種通過化學(xué)修飾將熒光染料DyLight 594與鏈霉親和素（Streptavidin）結(jié)合的復(fù)合物。其核心功能基團(tuán)為馬來酰亞胺（Maleimide, MAL），用于特異性標(biāo)記含巰基（-SH）的生物分子。該復(fù)合物在生物標(biāo)記領(lǐng)域具有應(yīng)用潛力，其制備過程涉及多步化學(xué)與生物技術(shù)操作。

二、制備步驟

1. 鏈霉親和素的純化

鏈霉親和素通常從細(xì)菌（如阿維丁鏈霉菌）發(fā)酵液中提取。通過多步色譜技術(shù)（如離子交換層析、親和層析）分離純化，獲得高純度的天然或重組鏈霉親和素。純化后的蛋白需通過SDS-PAGE和紫外吸收光譜驗(yàn)證純度與濃度。

2. DyLight 594 馬來酰亞胺染料的活化

DyLight 594 MAL染料為商業(yè)化試劑，其馬來酰亞胺基團(tuán)需在堿性條件下（如pH 7.5-8.5的磷酸鹽緩沖液）保持穩(wěn)定。制備時(shí)需避免染料水解或氧化，通?，F(xiàn)配現(xiàn)用或避光保存于低溫環(huán)境中。

3. 鏈霉親和素的馬來酰亞胺標(biāo)記

將純化的鏈霉親和素與DyLight 594 MAL染料按一定摩爾比（通常為1:5至1:10）混合于標(biāo)記緩沖液（如含0.1 M NaCl的PBS，pH 7.4）。反應(yīng)需在避光條件下進(jìn)行，溫度控制在4-25℃，持續(xù)2-4小時(shí)。馬來酰亞胺基團(tuán)與鏈霉親和素表面的游離巰基（如賴氨酸殘基的側(cè)鏈）發(fā)生共價(jià)結(jié)合。

4. 未反應(yīng)染料的去除

標(biāo)記完成后，通過凝膠過濾層析（如Sephadex G-25柱）或超濾離心法去除未結(jié)合的游離染料。收集含標(biāo)記復(fù)合物的洗脫峰，并通過紫外分光光度計(jì)測(cè)定染料與蛋白的結(jié)合比例（通常為3-5個(gè)DyLight 594分子/鏈霉親和素分子）。

5. 復(fù)合物的保存

標(biāo)記后的DyLight 594 MAL鏈霉親和素需分裝后避光保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。緩沖液可選用含0.1% BSA或1 mM EDTA的PBS，以增強(qiáng)穩(wěn)定性。

三、結(jié)構(gòu)與特性

該復(fù)合物保留了鏈霉親和素的高親和力（對(duì)生物素Kd≈10?1? M）和四聚體結(jié)構(gòu)，同時(shí)引入DyLight 594的熒光特性（激發(fā)峰約593 nm，發(fā)射峰約618 nm）。馬來酰亞胺基團(tuán)的引入使其能夠特異性標(biāo)記含巰基的分子（如抗體、肽段），擴(kuò)展其在生物檢測(cè)中的應(yīng)用場(chǎng)景。

四、注意事項(xiàng)

制備過程中需嚴(yán)格控制pH、溫度及避光條件，以減少非特異性結(jié)合和染料降解。標(biāo)記比例需通過實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，避免過高比例導(dǎo)致空間位阻或熒光猝滅。

產(chǎn)地：西安瑞禧生物

用途：科研

我們提供涵蓋peg多肽、ATTO、Alexa Fluor（AF染料）、AZDye、DyLight、Texas Red 以及 CF 系列染料。它們波長(zhǎng)跨度大，從可見光波段延伸至近紅外區(qū)域，為實(shí)驗(yàn)提供了豐富的選擇。其標(biāo)記方式多樣靈活，且擁有出色的穩(wěn)定性，在熒光成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫分析等實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色，是科研探索的有力工具助力實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)高效開展。歡迎咨詢yff

我們相關(guān)產(chǎn)品有

DyLight 515-LS WGA，DyLight 515-LS 小麥胚芽凝集素

DyLight 515-LS streptavidin，DyLight 515-LS Phalloidin

DyLight 510-LS 鬼筆環(huán)肽，DyLight 510-LS Phalloidin

DyLight 510-LS WGA，DyLight 510-LS 小麥胚芽凝集素

DyLight 510-LS streptavidin，DyLight 510-LS Phalloidin

DyLight 488 鬼筆環(huán)肽，DyLight 488 Phalloidin

DyLight 488 WGA，DyLight 488 小麥胚芽凝集素

DyLight 488 streptavidin，DyLight 488 Phalloidin

DyLight 488 MAL 鬼筆環(huán)肽，DyLight 488 MAL Phalloidin

DyLight 488 MAL WGA，DyLight 488 MAL 小麥胚芽凝集素

DyLight 488 MAL streptavidin，DyLight 488 MAL Phalloidin

DyLight 405 鬼筆環(huán)肽，DyLight 405 Phalloidin

DyLight 405 WGA，DyLight 405 小麥胚芽凝集素

DyLight 405 streptavidin，DyLight 405 Phalloidin

DyLight 405 MAL 鬼筆環(huán)肽，DyLight 405 MAL Phalloidin

DyLight 405 MAL WGA，DyLight 405 MAL 小麥胚芽凝集素

DyLight 405 MAL streptavidin，DyLight 405 MAL Phalloidin

DyLight 350 鬼筆環(huán)肽，DyLight 350 Phalloidin

DyLight 350 WGA，DyLight 350 小麥胚芽凝集素

DyLight 350 streptavidin，DyLight 350 Phalloidin