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半乳糖苷化修飾葡萄糖氧化
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半乳糖苷化修飾葡萄糖氧化
葡萄糖氧化(Glucose Oxidase,E.C.1.1.3.4,簡稱GOD)是一種專一性催化β-D-葡萄糖的需氧脫氫,應(yīng)用于、飼料、等行業(yè)中。研究利用一種單胺化的半乳糖衍生物,在炭化二亞胺的催化下,對GOD進(jìn)行糖苷化修飾,并利用蓖麻凝集素親和層析分離已修飾的和未修飾的。結(jié)果表明,蓖麻凝集素作為一種專一性半乳糖結(jié)合蛋白,能夠的與修飾后的GOD(結(jié)合了半乳糖的GOD,Gal-GOD)結(jié)合,將其從反應(yīng)混合液中純化出來。利用N2000色譜工作站軟件進(jìn)行面積積分,計(jì)算出GOD的修飾率已經(jīng)80%。Gal-GOD經(jīng)吸收光譜和熒光光譜分析,證實(shí)其結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。吸收光譜在380nm處的吸收峰消失,280nm的吸收峰也變矮變寬;熒光光譜在340nm的色氨酸殘基特征發(fā)射峰有降低,并且發(fā)生一定的紅移?；钚詸z測證明了Gal-GOD的熱穩(wěn)定性增加,在較溫度如在55℃下活性提了7.28倍。為GOD的應(yīng)用了基礎(chǔ)。
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