色譜過程的本質(zhì)是待分離物質(zhì)分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質(zhì)在兩相之間的分配會不同，這使其隨流動相運(yùn)動速度各不相同，隨著流動相的運(yùn)動，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。

     根據(jù)物質(zhì)的分離機(jī)制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。
　　

吸附色譜　　

　　吸附色譜利用固定相吸附中心對物質(zhì)分子吸附能力的差異實(shí)現(xiàn)對混合物的分離，吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質(zhì)分子競爭固定相吸附中心的過程
　　吸附色譜的分配系數(shù)表達(dá)式如下：
　　K_a =\frac{[X_a]}{[X_m]}
　　其中[Xa]表示被吸附于固定相活性中心的組分分子含量，[Xm]表示游離于流動相中的組分分子含量。分配系數(shù)對于計(jì)算待分離物質(zhì)組分的保留時(shí)間有很重要的意義。
　　

分配色譜

　　分配色譜利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實(shí)現(xiàn)分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑，依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔(dān)體表面。分配色譜過程本質(zhì)上是組分分子在固定想和流動相之間不斷達(dá)到溶解平衡的過程。
　　分配色譜的狹義分配系數(shù)表達(dá)式如下：
　　K=\frac=\frac{X_s/V_s}{X_m/V_m}
　　式中Cs代表組分分子在固定相液體中的溶解度，Cm代表組分分子在流動相中的溶解度。
　　

離子交換色譜　　

 

　　離子色譜分析法出現(xiàn)在20世紀(jì)70年代，80年代迅速發(fā)展起來，以無機(jī)、特別是無機(jī)陰離子混合物為主要分析對象。
　　離子交換色譜利用被分離組分與固定相之間發(fā)生離子交換的能力差異來實(shí)現(xiàn)分離。離子交換色譜的固定相一般為離子交換樹脂，樹脂分子結(jié)構(gòu)中存在許多可以電離的活性中心，待分離組分中的離子會與這些活性中心發(fā)生離子交換，形成離子交換平衡，從而在流動相與固定相之間形成分配。固定相的固有離子與待分離組分中的離子之間相互爭奪固定相中的離子交換中心，并隨著流動相的運(yùn)動而運(yùn)動，zui終實(shí)現(xiàn)分離。
　　離子交換色譜的分配系數(shù)又叫做選擇系數(shù)，其表達(dá)式為：
　　K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}
　　其中[RX + ]表示與離子交換樹脂活性中心結(jié)合的離子濃度，[X + ]表示游離于流動相中的離子濃度。

 

　　

凝膠色譜

 

　　凝膠色譜的原理比較特殊，類似于分子篩。待分離組分在進(jìn)入凝膠色譜后，會依據(jù)分子量的不同，進(jìn)入或者不進(jìn)入固定相凝膠的孔隙中，不能進(jìn)入凝膠孔隙的分子會很快隨流動相洗脫，而能夠進(jìn)入凝膠孔隙的分子則需要更長時(shí)間的沖洗才能夠流出固定相，從而實(shí)現(xiàn)了根據(jù)分子量差異對各組分的分離。調(diào)整固定相使用的凝膠的交聯(lián)度可以調(diào)整凝膠孔隙的大小；改變流動相的溶劑組成會改變固定相凝膠的溶漲狀態(tài)，進(jìn)而改變孔隙的大小，獲得不同的分離效果。