培養(yǎng)箱在實(shí)驗(yàn)室設(shè)備中的用途

     細(xì)胞培養(yǎng)箱所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的種類和使用建議，也有一定的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范：細(xì)胞培養(yǎng)主要重點(diǎn)在于保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。
1、顯微鏡：倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)*設(shè)備，主要用于日常了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況并觀察有無污染發(fā)生。如資金允許，建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時(shí)電影拍攝裝置等，可隨時(shí)拍攝并記錄細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
超凈工作臺(tái)：目前絕大部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺(tái)實(shí)現(xiàn)無菌操作，具有操作簡(jiǎn)單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。超凈工作臺(tái)主要有兩種——側(cè)流式（垂直式）和外流式（水平層流式）。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾，由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌區(qū)，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。
2、（1）側(cè)流式工作臺(tái)：空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺(tái)面流向?qū)?cè)，也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè)，形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌，工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式；
（2）外流式工作臺(tái)：凈化后的空氣面向操作者流動(dòng)，因而外方氣流不致混入操作，工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開放式，但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作對(duì)操作者不利。超凈工作臺(tái)應(yīng)需要定期請(qǐng)有關(guān)部門檢查潔凈度，符合要求的超凈工作臺(tái)其潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)，用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測(cè)粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)超過3.5個(gè)/L；空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s；細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個(gè)，根據(jù)無菌狀況必要時(shí)需要置換過濾器。
3、培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，一般適生長(zhǎng)溫度為37℃，溫差變化不應(yīng)超過±0.5℃。溫度升高2℃時(shí)，變不利于細(xì)胞生存，溫度達(dá)到40℃以上細(xì)胞將很快死亡。因此，可精確控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是選擇。
（1）恒溫培養(yǎng)箱：應(yīng)選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱，此類培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價(jià)格較便宜，其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。
（2）CO2培養(yǎng)箱：目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH，適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時(shí)，為使培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)與外界保持通氣狀態(tài)，可將瓶蓋略微旋松，為避免細(xì)胞被污染，使用這種培養(yǎng)方式時(shí)，培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔，需定期用紫外線照射或酒精消毒，同時(shí)培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置盛有無菌蒸餾水的水槽，防止培養(yǎng)液蒸發(fā)，保持箱內(nèi)相對(duì)濕度在100%。
（3）細(xì)胞培養(yǎng)耗材：培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶，萊貝在本篇不做詳細(xì)介紹，這部分知識(shí)會(huì)在實(shí)驗(yàn)室耗材知識(shí)部分作重點(diǎn)介紹。
4、細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器：儲(chǔ)存器常用的液氮容器，根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時(shí)需要考慮三個(gè)因素：容積大小、取放使用方便、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L，可以儲(chǔ)存1ml的安瓿250-15000個(gè)左右。液氮溫度低文帝可達(dá)-196℃，使用時(shí)應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā)，需注意觀察剩余液氮量，及時(shí)補(bǔ)充，避免液氮不足使細(xì)胞受損或死亡。目前有許多智能型細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器可供選擇，可配置有電子控制器的液氮儲(chǔ)存器，實(shí)現(xiàn)凍存自動(dòng)化；并可監(jiān)測(cè)液氮水平和樣品溫度，確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn)；可配置報(bào)警系統(tǒng)，設(shè)置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報(bào)警；同時(shí)具備熱氣體旁路系統(tǒng)，防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐，從而更有效地保護(hù)樣品，防止容器內(nèi)升溫。另外，可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲(chǔ)存罐補(bǔ)充液氮，保證樣品安全。