血液DNA核酸免提取試劑盒

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒能夠1分鐘內(nèi)裂解，10分鐘內(nèi)提取純化小量新鮮全血、抗凝血、血凝塊基因組DNA。使用高效硅基DNA純化柱，高效結(jié)合基因組DNA，從而獲得純度高，產(chǎn)量高的基因組。提取DNA可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文庫構(gòu)建等。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

備注：1、第一次使用前，在洗滌液DBW2中加入48mL無水乙醇，并標記“√"和時間，避免重復(fù)加入。

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、無DNase無RNase離心管、RNaseA（10mg/mL，或貨號QR0101）、蛋白酶K（20mg/mL，或貨號QR0103）

使用方法

1. 300μL血液（不足300μL，無菌PBS補齊）中加入500μL裂解液DB，55℃孵育1分鐘。

（選做）加入5μL RNase A（10mg/mL），室溫靜置5-10分鐘。

2. 加入10μL蛋白酶K，顛倒混勻，55℃孵育2分鐘。

備注：如果DNA提取量比較低，可延長孵育時間到10分鐘。

3. 12,000rpm離心30秒。

4. 取750μL上清加入375μL無水乙醇，顛倒混勻。

5. 全部加到DNA吸附柱中（需要離心兩次），12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

6. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DBW1，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DBW2，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

8. 重復(fù)步驟7一次。

9. 12,000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中廢液。

10. 將DNA吸附柱放入新無DNase無RNase離心管中，加入30-50μL洗脫液DB，室溫放置1分鐘。

11. 12,000rpm離心2分鐘，得到DNA溶液，-80℃保存。

注意事項

1、經(jīng)常更換手套，防止DNA污染。

2、使用無DNase無RNase的吸頭和離心管，防止DNA降解。

3、常更換吸頭，防止交叉污染。

4、動作輕柔，防止基因組DNA斷裂。

5、為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液DB置于65℃水浴后再使用。