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技術文章

德國progen PRAAV2R 說明書

點擊次數:2564 發(fā)布時間:2021-12-31

德國progen PRAAV2R 說明書

AAV2 Titration ELISA 2.0R

主要特點

ELISA 定量 AAV2 衣殼

檢測完整和空的 AAV2 衣殼

A20R抗體用作捕獲和檢測抗體

產品描述

數量96 項測試

反應性AAV2

貯存2-8°C

有可能的使用僅供研究使用

應用酶聯(lián)免疫吸附試驗

產品描述*的微量滴定板酶免疫分析,用于對 AAV2 的病毒粒子和組裝的空衣殼進行定量。重組捕獲抗體檢測未組裝衣殼蛋白上不存在的構象表位。

套件控制/標準AAV2的空衣殼制備

提供表格試劑盒,12 x 8 孔條

背景

ELISA原理:

德國progen PRAAV2R 說明書

該測定基于夾心 ELISA 技術,其中對組裝的 AAV 衣殼上的構象表位具有特異性的重組抗體被包被到板上,并用于從樣本中捕獲 AAV 顆粒。


捕獲的 AAV 粒子的檢測是一個兩步過程。


生物素偶聯(lián)的重組抗體與捕獲的 AAV 顆粒結合。

鏈霉親和素過氧化物酶偶聯(lián)物與生物素分子反應。添加底物會導致顏色反應,該反應與特異性結合的病毒顆粒的量成正比。

AAV量化方法的比較:


每種常用的量化方法都有其優(yōu)缺點:


qPCR被廣泛使用,但存在一些問題,例如樣品制備、引物設計或 PCR 效率,這些問題會導致實驗室間的結果差異很大。

數字液滴 PCR方法克服了 qPCR 的一些局限性。然而,由于不同的樣品處理協(xié)議,實驗室之間的差異仍然可能發(fā)生。

如果使用可靠的參考材料,斑點印跡是一種簡單且定量的方法。然而,它通常受到蛋白質印跡的有限線性和動態(tài)范圍的影響。

鑒于上述技術的實際缺點,傳統(tǒng)的夾心 ELISA 目前在實驗室間和實驗室內的變化以及易用性方面似乎更勝一仇。因此,它代表了可靠和可重復量化總 rAVV 衣殼滴度的最佳格式。

德國progen PRAAV2R 說明書

使用 shuffled/mutated AAV:


改組/突變 AAV 載體的識別取決于受改組/突變影響的特定衣殼區(qū)域。用于 PROGEN 的 AAV ELISA 的捕獲抗體結合特定的,在某些情況下,結合明確的構象表位。這些表位由相應 AAV 血清型的衣殼組裝產生。ELISA 可能識別您改組/突變的 AAV 載體的第一個跡象是抗體結合表位的存在。然而,衣殼蛋白的蛋白質序列的變化也可能影響蛋白質的構象,從而影響 AAV 衣殼上表位的構象。這可能會影響抗體的結合親和力并影響基于 AAV ELISA 試劑盒提供的(非改組)試劑盒對照的滴度確定。由于這些屬性在很大程度上取決于執(zhí)行的特定改組/突變,因此 PROGEN 無法保證對改組/突變的 AAV 載體進行成功和精確的量化。即使抗體結合表位仍然存在于您改組/突變的 AAV 衣殼上,您的檢測也需要針對您的特定 AAV 載體進行測試和優(yōu)化。


PROGEN 強烈建議生產和校準合適的(改組/突變)試劑盒對照,以確保使用 PROGEN ELISA 試劑盒對您單獨改組/突變的 AAV 載體進行可靠的滴度測定。


有限使用標簽許可:僅供研究使用的

產品由 PROGEN Biotechnik GmbH 擁有。將這些產品用于開發(fā)、制造和銷售基于購買的產品和/或包括購買的產品的次級產品/衍生物需要基于特許權使用費的分許可協(xié)議。

德國progen PRAAV2R 說明書

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