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夏季實(shí)驗(yàn)室里的相關(guān)事宜介紹
閱讀:1081 發(fā)布時間:2019-7-24轉(zhuǎn)眼,已經(jīng)來到了七月底,在這個熱氣沖天的七月,用一個字形容它,是“熱”;用兩個字形容它,是“很熱”;用三個字形容它,是“非常熱”。在這個熱氣直逼的夏天,客戶遇到的一些常見問題。
問題一:天氣這么熱,ELISA試劑盒開封后剩余試劑應(yīng)該如何保存?
答:針對已開封的試劑盒,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個月內(nèi)使用完畢,產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
問題二:實(shí)驗(yàn)結(jié)果不顯色或顯色值低什么原因?
答:1.底物配制問題或底物已失效。
2.酶標(biāo)抗體中酶失活或效率低或漏加酶標(biāo)抗體。
3.抗原抗體不匹配。
4.稀釋度太高。
5.洗板次數(shù)過多,洗滌沖擊力太大等原因。
問題三:要驗(yàn)證某個細(xì)胞上有無該蛋白的存在,需要做免疫組化和western blot試驗(yàn)嗎?
答:免疫組化可以用來進(jìn)行定位,但是不能定量,而且有時會有假陽性,不易與背景區(qū)分;Western blot可以特異性檢測某個蛋白質(zhì)分子,進(jìn)行定量,但是不能定位。
問題四:抗原檢測出的分子量比資料上的大,是怎么回事?
答:1.抗原形成了二聚體。增多巰基乙醇量,煮沸變性時間延長,可以打開二聚體。
2.蛋白本身的修飾如:糖基化,磷酸化等
問題五:為什么我的細(xì)胞提取液中沒有目標(biāo)蛋白?
答:1. 你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì),換一種細(xì)胞。
2.你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了,你必需加入PMSF,抑制蛋白酶活性。
3.你的抗體不能識別目標(biāo)蛋白,多看看說明,看是否有問題。
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