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冰凍切片彈性纖維偉郝夫范吉森染色試劑盒產(chǎn)品說明書
閱讀:858 發(fā)布時間:2023-3-8冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的
化學(xué)脫蠟方法和偉郝夫(Verhoeff)蘇木素以及媒染劑氯化鐵,分析和區(qū)分冰凍組織切片中的彈性纖維的
而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實驗證明的。適用于皮膚、腎臟、動脈組織等
染色。廣泛運用于動脈硬化、肺氣腫、血管病變和衰老等引起的彈性纖維異常等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即
到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。 技術(shù)背景
彈性纖維(elastic fiber),又稱為黃色纖維(yellow fiber),是固有結(jié)締組織(Connective tissue proper)細胞
外基質(zhì)的成分之一,由平滑肌細胞和成纖維細胞產(chǎn)生彈力蛋白質(zhì)(elastin)、原纖維蛋白(fibrillin;FBN)
等構(gòu)成。彈性纖維具有可伸展性。存在于皮膚、肺、動脈、靜脈、彈力軟骨、牙周韌帶(periodontal ligament)、
脂肪組織中。彈性纖維缺失導(dǎo)致皮膚松弛癥(cutis laxa)、威廉姆斯綜合征(Williams Syndrome)等疾病。
基于偉郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson;VVG)的發(fā)明,應(yīng)用遞減性(regressive)蘇木素選擇性染色彈
性纖維,通過媒染劑氯化鐵,幫助區(qū)別其它包括肌肉、膠原纖維、纖維蛋白(fibrin)等組織成分。偉郝夫
范吉森方法操作簡便,凸顯彈性纖維,難以細致區(qū)分其它組織成分。 產(chǎn)品內(nèi)容
清理液(Reagent A) 毫升
固著液(Reagent B) 毫升
染色液(Reagent C) 毫升
媒染液(Reagent D) 毫升
穩(wěn)定液(Reagent E) 毫升
復(fù)染液(Reagent F) 毫升
產(chǎn)品說明書 1 份
保存方式
保存在 4℃冰箱里,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意安全;有效保證 3 月
用戶自備
小型玻璃染色缸:用于組織或切片處理的容器
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實驗步驟
一、 樣品固著處理
1. 準(zhǔn)備好 5 微米厚的冰凍切片
2. 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
3. 室溫下孵育 2 分鐘
4. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
5. 小心加上 xx 微升固著液(Reagent B)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
6. 室溫下孵育 5 分鐘
7. 小心移去切片上的固著液(Reagent B)
8. 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
9. 室溫下孵育 2 分鐘
10.小心移去切片上的清理液(Reagent A)
二、 樣本染色處理
1. 小心加入 xx 微升染色液(Reagent C)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育 60 分鐘,避免光照(注意:組織切片呈現(xiàn)黑色)
3. 小心移去染色液(Reagent C)
4. 室溫下,小心將切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分鐘
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
6. 小心加入 xx 微升媒染液(Reagent D)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 室溫下孵育 2 分鐘,直至肉眼或顯微鏡下觀察背景呈現(xiàn)灰色,避免光照(注意:避免過度去色)
8. 小心移去媒染液(Reagent D)
9. 室溫下,小心將切片置入 x 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分鐘
10.小心移去切片上的清理液(Reagent A)
11.小心加入 xx 微升穩(wěn)定液(Reagent E)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
12.室溫下孵育 1 分鐘
13.小心移去穩(wěn)定液(Reagent E)
14.室溫下,小心將切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分鐘
15.小心移去切片上的清理液(Reagent A)
16.小心加入 xx 微升復(fù)染液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
17.室溫下孵育 5 分鐘
18.小心移去復(fù)染液(Reagent F)
19.室溫下,小心將切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分鐘
20.小心移去切片上的清理液(Reagent A)
21.(選擇步驟)透明澄清處理
22.放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
23.即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:
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注意事項
1. 本產(chǎn)品為 50 次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
4. 建議使用玻璃染色缸
5. 每次更換試劑溶液時,保持切片面基本晾干
6. 試劑溶液在切片表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿切片表面
7. 整個操作,在避光狀態(tài)下進行
8. 染色完成后,即刻進行光學(xué)顯微鏡觀察
9. 樣品染色后保存,避免光照
10.本公司提供系列特定組織染色試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰