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技術(shù)文章

組織蛋白酶K試劑盒在骨科表現(xiàn)的效果

閱讀:1017          發(fā)布時間:2015-7-17

定量測定人血清或細胞培養(yǎng)上清液中由破骨細胞分泌出的組織蛋白酶K。組織蛋白酶K降解骨膠原基質(zhì),是豐富的活化和吸收破骨細胞的合成蛋白,也是具吸收活性的特異性標(biāo)志物。蛋白酶K在組織溶解、重建和骨膠原降解中具有重要作用。組織蛋白酶K在不同物種間的高同源性(小鼠86%,大鼠88%,豬97%,兔96%),因此試劑盒也能用于動物模型的研究。

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二.組織蛋白酶K試劑盒臨床應(yīng)用:

  • 骨轉(zhuǎn)換研究
  • 惡性骨疾病
  • 應(yīng)用于腫瘤學(xué)
  • 監(jiān)測骨吸收藥物的療效
  • 預(yù)防糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松
  • 預(yù)防原發(fā)性和繼發(fā)性骨質(zhì)疏松
  • 監(jiān)測作用于骨骼多個區(qū)域的炎癥疾病
  • 監(jiān)控治療如激素替代治療,雙膦酸鹽治療
  • 監(jiān)測風(fēng)濕性骨關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎的治療療效
  • 蛋白酶k與骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變關(guān)系密切,特別在早期發(fā)病中有重要作用

 
3.組織蛋白酶K試劑盒樣本制備:
1. 病人在平臥安靜狀態(tài)下進行靜脈取血。采血量一般為2-3 ml。
2. 分析標(biāo)本可以是血清,或是細胞培養(yǎng)清液。
3. 室溫下,90分鐘內(nèi)離心分離并分析標(biāo)本。建議的離心分離條件是:4°C下2000轉(zhuǎn)離心15分鐘。
4. 在4°C標(biāo)本可以保存2天。
5. 若長時間保存標(biāo)本,可在-20°C 下或在-70°C的條件下存放。多進行4次解凍。
血脂標(biāo)本或溶血標(biāo)本會引起結(jié)果錯誤,因此,分析之前必須充分混合標(biāo)本。


四.組織蛋白酶K試劑盒操作步驟:


1 沖洗緩沖液(WASHBUF):
1. 稀釋濃縮洗液,稀釋比例為1:20,即 50 ml 洗液中加入 950 ml 蒸餾水。
2. 濃縮液中的晶體可在室溫下溶解。
3. 沖洗緩沖液在2°C - 8°C條件下穩(wěn)定,4. 在標(biāo)5. 注的有效期限內(nèi)都可使用。
6. 分析時只能使用稀釋后的洗液緩沖液。
3 標(biāo)準液(STD):
1. 在每個瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液;
2. 在室溫下(18-26°C)放置20分鐘;
3. 在VORTEX MIXER上充分混勻;
4. 標(biāo)準液若要分幾次使用,建議分裝保存,避免冷凍-解凍過程;5. 配制好的標(biāo)準液在-20°C下穩(wěn)定,可在有效期內(nèi)使用;
6. 一定不要將標(biāo)準液在室溫下放置
4 質(zhì)控液(CTRL):
5 在每個瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液;
6 在室溫下(18-26°C)放置20分鐘;
7 在VORTEX MIXER上充分混勻;
8 質(zhì)控液若要分幾次使用,建議分裝保存,避免冷凍-解凍過程;
9 配制好的質(zhì)控液在-20°C下穩(wěn)定,可在有效期內(nèi)使用;
10 一定不要將質(zhì)控液在室溫下放置。


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