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技術(shù)文章

怎樣辨別真假胎牛血清

閱讀:1631          發(fā)布時間:2015-7-20

市場上的胎牛血清品種繁復(fù),魚龍混雜,許多科研工作者,特別是剛觸摸細(xì)胞培育的人,難以分辯血清質(zhì)量的好壞。咱們從以下幾點剖析
一、外觀
拿到血清,早觸摸的是血清外觀,對于短少細(xì)胞培育經(jīng)驗的人來說,外觀的判別尤為重要

1、色彩
依據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或赤色,我國的細(xì)胞培育用血清規(guī)范是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的凹凸對血清并無直接影響,這個指標(biāo)的含義在于能體現(xiàn)出采血進(jìn)程的謹(jǐn)慎規(guī)范程度,杰出的操作能下降血清的溶血。

國產(chǎn)血清的采血點很渙散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出亮堂的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有規(guī)范含義上的胎牛血清。

進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真實的胎牛血清凝血功用差,紅細(xì)胞簡單決裂。

總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量佳的呈現(xiàn)出談黃、微赤色,如Gibco 16000,差點的呈現(xiàn)出橘赤色或鮮赤色。當(dāng)然,熱滅活血清或保留不妥的血清,因為血紅蛋白的損壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。

2、沉積
許多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉積,從而置疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有依據(jù)的。

血清中的沉積是由纖維蛋白的凝集發(fā)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉積的發(fā)生緣由許多,和廠家的加工出產(chǎn)方式密切相關(guān)。

國產(chǎn)的血清,大多來自北方,因為價格低廉,保留環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運送到出產(chǎn)會經(jīng)過屢次凍融,每次凍融進(jìn)程,就會分出有些纖維蛋白沉積,這么,血清制品過濾后看起來反而愈加的“潔凈",很少有沉積發(fā)生。

進(jìn)口的胎牛血清,過濾分裝前很少會重復(fù)凍融,出產(chǎn)后的制品也是明澈的,但跟著時刻的推移,血清中的許多纖維蛋白會分出構(gòu)成沉積。當(dāng)然,進(jìn)口的重生牛血清,通常牛齡都在2周擺布,血清中的各種蛋白含量顯著偏高,出產(chǎn)后血清也許會渾濁,甚至有許多沉積。

當(dāng)然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),運用時需求消融,消融進(jìn)程佳在溫度較低的狀態(tài)下漸漸進(jìn)行,不然沉積相對較多,雖然沉積并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。

3、弄清度
進(jìn)口胎牛血清因為蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為淡薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是重生牛血清,相對而言愈加粘稠,色彩略深,這對于開始觸摸血清的人很難判別,但把兩者進(jìn)行比照,可簡單分辯。

二、首要技術(shù)指標(biāo)
現(xiàn)在國內(nèi)血清的質(zhì)量規(guī)范是2005版的《中華人民共和國藥典》,首要指標(biāo)有以下幾點:

1、內(nèi)毒素
規(guī)范為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因而內(nèi)毒素含量的凹凸可表現(xiàn)出采血到出產(chǎn)一系列進(jìn)程中的無菌操作狀況。現(xiàn)在,國產(chǎn)血清根本都能到達(dá)這一請求,許多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只請求不高于50EU/ml,高出我國規(guī)范10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質(zhì)量也未見影響??梢姡瑑?nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量*,預(yù)示著現(xiàn)已污染。

2、總蛋白含量
胎牛血清通常規(guī)模是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,闡明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,標(biāo)明血清也許摻水了。

3、血紅蛋白
規(guī)范為不高于20mg/dl,色彩越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。

4、pH
國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,詳細(xì)緣由不知道,也許和牛齡有關(guān),這也能用來開始辨別血清的來歷。

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5、微生物
包含細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。跟著國內(nèi)血清廠家出產(chǎn)條件的改進(jìn)進(jìn)步,細(xì)菌、霉菌等“大型"微生物簡直能100%操控,支原體經(jīng)過0.1um過濾,大多也能鏟除。大腸桿菌噬菌體的污染仍是對比嚴(yán)峻的,首要是出產(chǎn)環(huán)境進(jìn)程中帶入,又無法過濾,很難*鏟除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中簡直90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中根本都操控的*。

6、免疫球蛋白
國產(chǎn)血清的僅僅定性檢查,成果也很不,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢查。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時的牛齡狀況,國產(chǎn)血清,根本都是重生牛的,血清中簡單發(fā)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。

7、其它
不管是國產(chǎn)仍是進(jìn)口血清,都是意外抗生素的(無四環(huán)素胎牛血鏟在外)。國外,抗生素的運用很嚴(yán)厲,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包含血清都可以溯源的,因而可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nèi),抗生素的亂用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細(xì)胞培育極為晦氣,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本緣由。

三、血源
市場上的血清血源首要分為我國、北美、南美和澳洲。

1、國產(chǎn)血清質(zhì)量差,這是*的,首要緣由并不是出產(chǎn)廠家的職責(zé),而是天然環(huán)境差和抗生素的許多運用。國內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)峻,一起養(yǎng)殖進(jìn)程中抗生素亂用,有毒有害物質(zhì)會許多殘留在血清中,終究晦氣于細(xì)胞的成長。

2、南美血清,來歷許多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清因為采血的不可控性,質(zhì)量良莠不齊,當(dāng)然,相對于國內(nèi)血清來說好的多。別的,國內(nèi)出售的南美血清大多色彩鮮紅,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清破例,這也許和各國的采血、出產(chǎn)工藝有關(guān)。

3、北美血清,首要來自美國和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清,等級越高的色彩越淡,表現(xiàn)為淡黃中帶一點微紅,SH30070和SH30396比照就很顯著,特級胎牛血清根本就能進(jìn)行干細(xì)胞培育。北美血清還有一個顯著特點即是每瓶血清都能溯源,這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要。

4、澳洲血清,來歷首要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運以后進(jìn)入我國市場的,通常不具有溯源功用,因為出產(chǎn)、運送等緣由,價格相對來說對比貴

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