技術(shù)文章
ELISA的原理以及ELISA的基本類型
閱讀:1120 發(fā)布時間:2016-1-14971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。
ELISA的原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
進(jìn)行檢測時,樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,此時,能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色,根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量,進(jìn)行定性或定量的分析。
由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的靈敏度。
ELISA的基本類型
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。這種測定方法中有3種必要的試劑:
1. 固相的抗原或抗體;
2. 酶標(biāo)記的抗原或抗體;
3. 酶作用的底物。
根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。