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技術(shù)文章

乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒說明書

閱讀:1269          發(fā)布時間:2016-6-13

         我公司乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑一種旨在通過酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)檢測由于細(xì)胞損傷導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細(xì)胞外,使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑INT)還原為紅色甲臜(farmazan,即比色法定量測定酶活性,以評價活體細(xì)胞繁殖的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種藥物、化學(xué)、環(huán)境因子和營養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長中的動物或人體細(xì)胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測的佳選擇。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,簡捷敏感,性能穩(wěn)定,顯色清晰,檢測準(zhǔn)確,重復(fù)性好。

注意事項

1   本產(chǎn)品為100次(1個96孔板)操作

2   操作時須戴手套

3   整個操作須無菌操作

4   建議每個樣品安排3個孔,即重復(fù)3次,計算時取其平均值

5   檢測體系相應(yīng)增加,試劑用量按比例相應(yīng)增加:例如200微升檢測體系,試劑用量增加1倍

6   每孔中的培養(yǎng)液需100微升,避免使用周邊培養(yǎng)孔(常常液體蒸發(fā)而減少)

7 系統(tǒng)測試,可以加入10微升標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent G)到50微升無細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液里,然后加入反應(yīng)液和顯色液即可

8   細(xì)胞裂解效果不佳,可以使用20微升裂解液(Reagent A)處理

9   孵育時,須避光

10  染色完成后,建議即刻檢測,遲不得超過1小時

11  細(xì)胞培養(yǎng)和處理時,避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和EDTA,否則影響檢測的準(zhǔn)確性

12  血清含有乳酸脫氫酶,建議使用濃度不要超過1%

13  細(xì)胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過大等因素會造成細(xì)胞自然釋放乳酸脫氫酶

13  酚紅會干擾檢測

14  樣品大酶活性對照孔或大OD吸光讀數(shù)與細(xì)胞裂解程度密切相關(guān)

15  如果用戶沒有孔板離心機,則移取上清液時格外小心

16  如果用戶沒有匹配的波長,可以使用波長470nm至570nm之間的任一波長

 

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乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒(含標(biāo)準(zhǔn)液)

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