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細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

閱讀:911          發(fā)布時間:2015-4-7
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主要用途


 細菌異檸檬酸脫氫酶(ISOCITRATE DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過反應系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸NADP還原后峰值的變化即采用比色法來測定細菌裂解樣品中酶活性而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌細胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。


技術背景


異檸檬酸脫氫酶(isocitrate dehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循環(huán)citric acid cycle)或克雷布斯循環(huán)Krehes cycle)中的酶之一,存在于所有生物體內(nèi)。細菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶:同源雙體,40至45Kd分子量;單體,80至100Kd分子量。在細菌體內(nèi),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸oxidized β-Nicotinamide adenine dinucleotide –phosphate;NADP)依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子(Mn)的推動,脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳(氧化性脫羧基作用),轉化α-酮戊二酸α-ketoglutarate),同時生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸reduced β-Nicotinamide adenine dinucleotide –phosphateNADPH。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中,以及有限的葡萄糖條件下,異檸檬酸脫氫酶則失活,從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路(glyoxylate bypass)之間碳的流動。基于異檸檬酸脫氫酶的NADP依賴性,和作用后所產(chǎn)生的NADPH,通過分光光度儀的峰值變化340nm 波長),來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應系統(tǒng)為:


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