國(guó)內(nèi)的廠家，以前我念書的時(shí)間，晶美做的很不錯(cuò)，也受到了客戶的好評(píng)，后來(lái)聽(tīng)說(shuō)，由于資金鏈的問(wèn)題，遣散了，真是可惜。如今我們市場(chǎng)推薦給客戶的都是上海吉泰和深圳達(dá)科為的試劑盒，質(zhì)量在靈敏度上和RnD的試劑盒依舊有很大差距，但是有一點(diǎn)是可以肯定的，試劑盒反應(yīng)的效果是公正客觀的。另有一個(gè)缺點(diǎn)便是這兩個(gè)廠家可供選擇的盒子種類比較少，主要集中在炎癥細(xì)胞因子上。

         ELISA試劑盒的挑選以及應(yīng)用

    談一下怎樣靈活應(yīng)用ELISA這個(gè)檢測(cè)方法以及怎樣去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個(gè)方法的原理，大家都很明白，網(wǎng)上的資料很多?？烧嬲闷饋?lái)的時(shí)候，偶然間就會(huì)有點(diǎn)犯糊涂，我談一下自己的理解。

    1、有些客戶會(huì)用OVA（卵清卵白）做一些哮喘，過(guò)敏性腸炎的模型，然后會(huì)檢測(cè)粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG，IgE等指標(biāo)。當(dāng)客戶向我咨詢購(gòu)置這幾個(gè)指標(biāo)的試劑盒的時(shí)候，我很肯定地說(shuō)這些指標(biāo)的檢測(cè)要你自己特制，不會(huì)有商品化的試劑盒出售的。當(dāng)你baidu或google一下時(shí)，頁(yè)面出來(lái)大量的商品化的試劑盒，千篇一律的明書時(shí)候，我真的是蒙了，我懷疑自己跟不上時(shí)代了。我不去評(píng)論這些試劑盒的真假，我仍舊建議做這些檢測(cè)指標(biāo)的朋友，選擇sigma公司V級(jí)別的OVA，然后用這個(gè)來(lái)造模，自己包板摸條件，用OD值來(lái)比較抗體含量的變化。

    2、對(duì)付一些小分子的檢測(cè)，例如：前線腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測(cè)，我的理解是要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去檢測(cè)，也要購(gòu)買采用這個(gè)方法的盒試劑盒。一般細(xì)胞因子的檢測(cè)，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè)，由于因子分子量比力大，一般10幾個(gè)KD左右，很容易找到兩個(gè)或多個(gè)抗原表位。

    而小分子很難找到兩個(gè)不通的表位，也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無(wú)法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗，每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶標(biāo)志的檢測(cè)抗體，顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高，吸光度越低。

    3、對(duì)付胰島素的檢測(cè)，我還是推薦millpore 旗下LInco公司的檢測(cè)試劑盒，不管是放免還是ELISA，據(jù)說(shuō)權(quán)在他們手中。 近看了資料，瑞典Mercodia公司的胰島素檢測(cè)試劑盒也是得到市場(chǎng)的承認(rèn)的。對(duì)付ox-ldl的檢測(cè)，Mercodia公司也是很牛的。

    4、NO的檢測(cè)，一般都是采用經(jīng)典的Greiss法，如今市場(chǎng)上竟然有NO ELISA試劑盒，真是徹夜未眠也搞不明白。另外還有做氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA的檢測(cè)，我還是推薦各位用碧云天或者進(jìn)口的檢測(cè)試劑盒，而不是ELISA試劑盒。

    5、我主要的客戶是醫(yī)學(xué)院校，做實(shí)行面向的種屬重要是人，大鼠和小鼠，如今市面市情上雞、牛、馬、羊、兔種種指標(biāo)的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎么來(lái)的。據(jù)我所相識(shí)，這些炎癥指標(biāo)依然有很大種屬特異性的。

    6、ELISA檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，靈敏度高，我個(gè)人認(rèn)為ELISA適合檢測(cè)血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測(cè)；病原體抗原的定性與定量；評(píng)估自己制備的血清抗體的效價(jià)等。很多客戶有個(gè)誤區(qū)，拿來(lái)一個(gè)指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測(cè)，我還是建議多動(dòng)腦，該檢測(cè)活性的檢測(cè)活性，該做western的做western。

    第三 談一下上海哈靈的ELISA試劑盒，這個(gè)公司的產(chǎn)物許多客戶也發(fā)表了SCI文章，要是我沒(méi)有記錯(cuò)的話，mouse TGF-beta1 這個(gè)試劑盒發(fā)表在nature immunology上面，25分多的雜志。這個(gè)廠產(chǎn)業(yè)的試劑盒，是我公司主推的盒子，給我的覺(jué)得是靈敏度不夠高，個(gè)位數(shù)pg級(jí)達(dá)不到，血清細(xì)胞因子的檢出率比力低，在估計(jì)范疇內(nèi)。大概隨著國(guó)內(nèi)研究技能的不停改進(jìn)，我想應(yīng)該會(huì)逐步解決這個(gè)問(wèn)題。