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RNA體外合成原來也可以這么方便

2020-10-17  閱讀(1641)

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RNA體外合成原來也可以這么方便

 

隨著生物科技的發(fā)展,細胞治療和基因治療業(yè)已成為重要的前沿疾病治療技術,利用RNA體外合成技術制備的mRNA疫苗在2020年突發(fā)的CO///VID-19傳染病上產生了巨大的影響很多公司如美國Moderna、德國CureVac、BioNTech等均已經開展了其他疾病如腫瘤、傳染病、慢性病等治療性mRNA疫苗和藥物開發(fā)。

 

 

圖:基于mRNA(癌癥)疫苗開發(fā)中的開創(chuàng)性階段和里程碑[1]

 

表1:國內外主要的mRNA疫苗公司概況

公司名稱

成立時期

注冊地

研究技術平臺

Argos Therapeutics

1997

美國

擁有*免疫療法技術Arcelis平臺

CureVac

2000

德國

擁有RNActive、RNArt、RNAntibody、RNAdjuvant 技術平臺

BioNTech

2008

德國

擁有mRNA藥物/疫苗、細胞治療、抗體藥物等藥物研發(fā)平臺

Moderna

2010

美國

擁有mRNA技術、交付技術和制造流程mRNA轉化藥物平臺

eTheRNA Immunotherapies

2013

比利時

擁有基于APC激活mRNA平臺開發(fā)新的免疫腫瘤療法

斯微生物

2016

中國

擁有中國領///先的mRNA藥物平臺和產品管線

注:以上信息均來自對應公司官///網(wǎng)信息

體外合成RNA(IVT)主要是以DNA為模板通過體外轉錄得到,常用的是以線性化質粒DNA或PCR擴增產物為模板利用RNA聚合酶在體外轉錄合成。主要過程是利用含有T7啟動子(TAATACGACTCACTATAGGG)或SP6啟動子(ATTTAGGTGACACTATAG)序列的DNA為模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的條件下,以NTP為底物合成與模板DNA中一條鏈互補的mRNA,簡單快速獲得大量的mRNA分子通過5’端加上帽子結構和3’端加ployA尾加強mRNA的穩(wěn)定性。

 

圖:體外轉錄(IVT)mRNA生產和裝配過程[2]

 

體外合成RNA應用

 

 

 

體外合成RNA你是否有以下困惑

 

(1)如何獲得轉錄模板?

(2)為什么自己配置反應體系無論如何優(yōu)化都無法獲得足夠高的產率?

(3)有沒有一款包含全套反應試劑的Kit,讓我不在為體系配置而煩惱?

(4)需要一款性價比高的T7 Kit,讓研究經費不在是我科研路上的攔路虎?

(5)有沒有一款試劑盒適用于多種類型RNA的合成?

……

翊圣生物經過匠心研發(fā),開發(fā)出的高性價比的T7高產量體外合成試劑盒包含一整套的RNA合成所需試劑,并配有詳細的教程。本試劑盒可以合成長轉錄本以及短轉錄本,以1μg的模板投入量可以產生100-200 μg的RNA,適用于單鏈 RNA合成(包括siRNA等各類RNA前體及RNA探針)和以Cap analog為引物合成Capped mRNA。

 

HifaiT7 High Yield RNA Synthesis Kit測試數(shù)據(jù)

 

 

  圖:不同長度轉錄-時間梯度電泳圖

 

             

短片段:2-4h可有效轉錄                        長片段:1-2h可有效轉錄

圖:不同目的片段的轉錄產量

 

            

不同長度RNA轉錄                                                    RNA轉錄品質測定(安捷倫2100)

圖:不同長度RNA轉錄及品質測試

 

翊圣生物提供您高品質、高性價比的T7合成試劑盒,助力您的科學研究和藥物及疫苗的發(fā),共同為人類的未來健康事業(yè)奉獻一份力量。

 

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Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit

10623ES50/60

50/100T

相關產品

產品名稱

貨號

規(guī)格

GTP Solution(100 mM)  鳥苷三磷酸溶液(100 mM)

10132ES03

1ml

NTP Set Solution(ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each)

10133ES03

1 Set (4 vial)

Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas

脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

10607ES15/81

1/10*15KU

Murine RNase Inhibitor(200 U/μL) 鼠源RNase抑制劑

10610ES05/10

2/10KU

mRNA Vaccinia Capping Enzyme

10615ES76/84

500/2000U

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

10616ES84/92

2000/10000U

T7 RNA Polymerase (1 KU/μl)

10617ES92/97

10/50KU

S-adenosylmethionine (SAM)

10619ES02

0.5ml

Murine RNase inhibitor (200U/μl , Glycerol-free) 鼠源RNase抑制劑

10703ES05/10

2/10KU

 

【1】Verbeke, Rein & Lentacker, Ine & De Smedt, Stefaan & Dewitte, Heleen. (2019). Three decades of messenger RNA vaccine development. Nano Today. 100766. 10.1016/j.nantod.2019.100766.

【2】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response,Trends in Molecular Medicine,Volume 26, Issue 3,2020,Pages 311-323,

 

關于翊圣生物

上海翊圣生物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd)成立于2009年,是國家高新技術型企業(yè),長期專注于分子酶原料及建庫試劑盒等產品的研發(fā)和生產。

我們的目標讓下游企業(yè)節(jié)省更多的成本,為中國精///準醫(yī)療的發(fā)展貢獻自己的力量。

翊圣生物擁有*分子酶雙向技術平臺、大規(guī)模蛋白發(fā)酵純化技術平臺、高效抗體篩選技術平臺,目前已成功開發(fā)各類診斷分子酶、二代測序建庫酶等40余種,并實現(xiàn)工業(yè)放大。翊圣生物開發(fā)的PCR類、NGS類、體外診斷(IVD)和相關酶原料等產品獲得了廣大客戶的認可。此外,我們還為工業(yè)客戶提供定制化開發(fā)服務,以滿足個性化需求         

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