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利用RNA體外合成（IVT）技術(shù)制備的mRNA疫苗在傳染病的防治上產(chǎn)生了巨大的影響，無論是其開發(fā)生產(chǎn)周期以及疫苗的安全、高效性都明顯優(yōu)于傳統(tǒng)疫苗，因此具有極大的發(fā)展?jié)摿?/span>。
▲ 圖1.疫苗接種圖（攝圖網(wǎng)）
mRNA疫苗主要是體外合成RNA，是以DNA為模板通過體外轉(zhuǎn)錄得到，常用的是以線性化質(zhì)粒DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物為模板利用RNA聚合酶在體外轉(zhuǎn)錄合成再進(jìn)行修飾獲得。是利用含有T7啟動子（TAATACGACTCACTATAGGG）或SP6啟動子（ATTTAGGTGACACTATAG）序列的DNA為模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的條件下，以NTP為底物合成與模板DNA中一條鏈互補(bǔ)的mRNA，簡單快速獲得大量的mRNA分子，通過在5’端加上帽子結(jié)構(gòu)和3’端加ployA尾加強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性。
▲ 圖2.體外轉(zhuǎn)錄（IVT）mRNA生產(chǎn)和裝配過程[1]
體外合成RNA應(yīng)用方向
體外合成RNA常見問題和困惑
T7Kit測試數(shù)據(jù)
<不同長度rna轉(zhuǎn)錄>
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產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Hifair®T7 High Yield RNA Synthesis Kit | 10623ES50/60 | 50/100 T |
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NTP Set Solution(ATP,CTP,UTP,GTP,100 mM each） | 10133ES03 | 1 Set (4 vial) |
參考文獻(xiàn)
