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急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見(jiàn)的急腹癥，病因復(fù)雜，病死率達(dá)5%~10%，重癥AP死亡率高達(dá)20%~30%，目前發(fā)病機(jī)制尚未闡述，無(wú)特殊治療方式。目前活體AP動(dòng)物模型制作常用方法大致有胰管結(jié)扎法、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、胰膽管注射法結(jié)合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內(nèi)注射法等。
生理?xiàng)l件下，胰腺大量攝取氨基酸以合成胰酶，但高濃度氨基酸聚集會(huì)破壞胰腺外分泌腺，誘發(fā)AP。L-Arg（L-精氨酸）是應(yīng)用較為廣泛的用于誘導(dǎo)AP動(dòng)物模型的堿性氨基酸。
圖1 L-精氨酸分子結(jié)構(gòu)(CAS NO.74-79-3）
牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)胰腺炎建模步驟（僅供參考）
動(dòng)物：
L-精氨酸可以誘導(dǎo)大多數(shù)動(dòng)物發(fā)生AP，但是此類(lèi)模型主要應(yīng)用于嚙齒類(lèi)動(dòng)物（如大鼠和小鼠）。
溶液配置：
用0.85%鹽水制備L-精氨酸溶液，并過(guò)濾以使其無(wú)菌。
造模方法：
L-Arg誘導(dǎo)AP動(dòng)物模型，通常劑量為250-500mg/100g。L-Arg的作用呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性，單次注射L-Arg 500mg/100g，70-80%胰腺腺泡細(xì)胞在3d內(nèi)壞死，3次注射L-Arg 250mg/100g超過(guò)10d，近90%的腺泡被破壞。
1、大鼠：腹腔內(nèi)給藥1g/kg，1次；
2、小鼠：腹腔注射3×3或4×2.5 g/kg，10%，每次間隔1h。
模型判定指標(biāo)：
注射后3、6、12h檢測(cè)血清淀粉酶水平、胰腺組織的濕/干質(zhì)量比率及病理組織學(xué)評(píng)分，觀察24h生存指數(shù)
表1 胰腺的組織學(xué)評(píng)估
水腫 | 0 | 無(wú)水腫 |
1 | 小葉間水腫 | |
2 | 小葉間和中度小葉內(nèi)水腫 | |
3 | 小葉間水腫和嚴(yán)重的小葉內(nèi)水腫 | |
白細(xì)胞浸潤(rùn) | 0 | 無(wú) |
1 | 稀少的血管周?chē)?rùn) | |
2 | 中度血管周?chē)拖∩俚膹浡越?rùn) | |
3 | 大量彌漫性浸潤(rùn) | |
壞死 | 0 | 無(wú)壞死 |
1 | 少于15%的胰腺細(xì)胞 | |
2 | 15-35%的細(xì)胞參與 | |
3 | 超過(guò)35%的細(xì)胞參與 |
模型優(yōu)點(diǎn)：
操作簡(jiǎn)便，價(jià)廉，對(duì)機(jī)體損傷小，死亡率低，有良好的時(shí)間和劑量依賴(lài)性，所致胰腺炎與人胰腺炎相似，病變均勻。但個(gè)體差異大，病理機(jī)制與臨床相關(guān)性差。
實(shí)驗(yàn)案例
圖2 L-精氨酸誘導(dǎo)胰腺炎造模結(jié)果（引用自doi.org/10.3390/nu14132591）
實(shí)驗(yàn)采用C57BL/6小鼠（雄性，8周齡，體重22-25克），腹腔注射L-精氨酸溶液誘導(dǎo)胰腺炎（3.0 g/kg, q1 h, 3 h），檢測(cè)淀粉酶水平（b）、血清中脂肪酶（c）和LDH（d）、（e）胰腺組織中IL-1β的水平、（f）觀察胰腺的大體形態(tài)以及（gi）L-精氨酸急性胰腺炎胰腺的代表性H&E圖像。
相關(guān)產(chǎn)品
分類(lèi) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
胰腺炎建模試劑 | Caerulein 雨蛙素 | 60321ES03 | 1 mg |
Taurocholic acid Sodium Salt?；悄懰徕c | 60398ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
L-Arginine L-精氨酸 | 61302ES60/76 | 100/500 g | |
其他試劑 | Sodium Cloride 氯化鈉 | 60372ES76/96 | 500g/25kg |
DMSO 二甲基亞砜（細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)） | 60313ES60 | 100 mL | |
Hematoxylin and Eosin Staining Kit 蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒 | 60524ES60 | 2×100 mL |
相關(guān)專(zhuān)題
1. 雨蛙素誘發(fā)的急性胰腺炎動(dòng)物模型
2. ?；悄懰徕c誘導(dǎo)嚴(yán)重急性胰腺炎模型（severe acute pancreatitis，SAP）
