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上新 | 保姆級(jí)ATAC建庫(kù)試劑盒,輕松carry表觀建庫(kù)

2024-1-26  閱讀(376)

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表觀遺傳學(xué)是指研究活性和非活性基因表現(xiàn)的遺傳變化。變化的來(lái)源既可以是外在環(huán)境因素,也可以是內(nèi)在因素,例如年齡和疾病。它通常用于診斷潛在疾病并防止其遺傳給后代。IMARC Group的市場(chǎng)調(diào)研報(bào)告顯示2022年全球表觀遺傳學(xué)市場(chǎng)規(guī)模達(dá)21億美元,預(yù)計(jì)到2028年市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到51億美元,2022-2028年復(fù)合年增長(zhǎng)率(CAGR)為15.9%。

 

眾多表觀遺傳研究技術(shù)中,ATAC-seq(Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequencing)可謂,自2015年問(wèn)世以來(lái),,且逐漸成為表觀研究課題必選技術(shù)之一。

 

ATAC-seq介紹

ATAC-seq全稱(chēng)Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequencing,即利用轉(zhuǎn)座酶研究染色質(zhì)可進(jìn)入性的高通量測(cè)序技術(shù)。多數(shù)基因組中的染色質(zhì)都緊緊盤(pán)繞在細(xì)胞核內(nèi),但也有一些區(qū)域經(jīng)染色質(zhì)重塑后呈現(xiàn)出松散的狀態(tài),這部分無(wú)核小體的裸露DNA區(qū)域被稱(chēng)為開(kāi)放染色質(zhì)(open chromatin),而DNA復(fù)制和基因轉(zhuǎn)錄都發(fā)生在這些區(qū)域。 染色質(zhì)的這種特性叫做染色質(zhì)的易接近性(chromatin accessibility),通過(guò)研究細(xì)胞特定狀態(tài)下開(kāi)放的染色質(zhì)區(qū)域可以在DNA水平上了解其轉(zhuǎn)錄調(diào)控。

 

  • 開(kāi)放染色質(zhì)區(qū)域:染色質(zhì)是否呈疏松結(jié)構(gòu)是決定轉(zhuǎn)錄功能的關(guān)鍵因素,該區(qū)域通常是一些順式調(diào)控元件結(jié)合區(qū)域;

  • 此時(shí)Tn5酶利用空間位阻效應(yīng)進(jìn)行識(shí)別和切割,Tn5酶會(huì)優(yōu)先整合到主動(dòng)轉(zhuǎn)錄或高度超卷曲的DNA區(qū)域中(即染色質(zhì)開(kāi)放區(qū)域)。

 

 

ATAC-seq技術(shù)應(yīng)用

通過(guò)ATAC-seq可以獲得豐富的表觀遺傳信息,包括開(kāi)放染色質(zhì)圖譜、核小體定位、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn),并通過(guò)鑒定染色質(zhì)開(kāi)放區(qū)域中轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn),分析得到轉(zhuǎn)錄因子及調(diào)控區(qū)域。

 

  • 染色體開(kāi)放性圖譜繪制;

  • 胚胎發(fā)育表觀遺傳修飾;

  • 疾病潛在標(biāo)志物的預(yù)測(cè);

  • 腫瘤發(fā)生表觀機(jī)制研究;

  • 腫瘤分型與微環(huán)境研究。

 

圖.ATAC研究的開(kāi)放區(qū)域中,DNA結(jié)合蛋白結(jié)合DNA后,影響下游基因的轉(zhuǎn)錄

 

 

ATAC建庫(kù)試劑盒優(yōu)勢(shì)

 

  • 含lysis buffer(細(xì)胞核打孔);

  • 含ATAC建庫(kù)全套試劑,轉(zhuǎn)座反應(yīng)后的小片段專(zhuān)用純化磁;

  • 含Digitonin和tween-20,增加細(xì)胞核通透性。

 

 

ATAC建庫(kù)試劑盒性能

 

圖.100-10 w細(xì)胞投入量進(jìn)行ATAC建庫(kù),結(jié)果一致性較高。

 

 

圖:凍存細(xì)胞進(jìn)行ATAC建庫(kù),結(jié)果一致性較高。
注:樣本需要進(jìn)行長(zhǎng)期保存時(shí),建議用液氮保存,-80℃冰箱保存時(shí)間不超過(guò)4周。

 

 

圖:競(jìng)品試劑盒與翌圣ATAC試劑盒進(jìn)行性能對(duì)比,從100-10w細(xì)胞,文庫(kù)結(jié)果一致性較高,且文庫(kù)測(cè)序結(jié)果一致(另外,100個(gè)細(xì)胞投入,翌圣結(jié)果優(yōu)于競(jìng)品)

 

 

ATAC技術(shù)文章應(yīng)用

01

ATAC開(kāi)放性圖譜繪制

Howard Y. Chang教授團(tuán)隊(duì)從癌癥基因組圖譜組織(TCGA)中選取23種癌癥類(lèi)型,410個(gè)腫瘤樣品進(jìn)行ATAC-seq分析,繪制了囊括23種人類(lèi)癌癥類(lèi)型的796個(gè)全基因組染色質(zhì)可接近性圖譜,平均每種癌癥類(lèi)型中鑒定了近十萬(wàn)個(gè)染色質(zhì)可接近性敏感位點(diǎn),揭示了一系列與染色質(zhì)可接近性有關(guān)的調(diào)控相互作用,這些相互作用可改變與癌癥風(fēng)險(xiǎn)和治療結(jié)果相關(guān)的基因表達(dá)。

 

The chromatin accessibility landscape of primary human cancers


原發(fā)性人類(lèi)癌癥的染色質(zhì)可及性景觀
期刊:Science        IF:41.037

圖.410 個(gè)樣本繪制23種癌癥的染色質(zhì)可及性圖譜

02

ATAC在胚胎發(fā)育中的遺傳修飾

文章聯(lián)合ATAC-seq和RNA-seq檢測(cè)了早期胚胎發(fā)育過(guò)程中各時(shí)期染色質(zhì)結(jié)構(gòu)開(kāi)放區(qū)域的動(dòng)態(tài)變化,發(fā)現(xiàn)不同時(shí)期的細(xì)胞開(kāi)放區(qū)域的動(dòng)態(tài)變化情況,并得到胚胎發(fā)育時(shí)期關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,繪制出了小鼠早期胚胎中全基因組易接近性染色質(zhì)圖譜。

 

The landscape of accessible chromatin in mammalian preimplantation embryos

哺乳動(dòng)物植入前胚胎中可及染色質(zhì)的景觀

期刊:Nature       IF:40.137

圖.小鼠著床前胚胎細(xì)胞染色質(zhì)開(kāi)放性可視圖

 

翌圣生物ATAC建庫(kù)試劑盒為即用型ATAC建庫(kù)試劑盒,將樣本提核后,按照說(shuō)明書(shū)操作,無(wú)需其他試劑,即可構(gòu)建ATAC文庫(kù)。

 

簡(jiǎn)單且標(biāo)準(zhǔn)化,我們一直在努力!

 

 

產(chǎn)品推薦

產(chǎn)品名稱(chēng)

貨號(hào)

規(guī)格

Hieff NGS® ATAC-Seq Library Prep Kit for Illumina®ATAC建庫(kù)試劑盒

12208ES12/48

12 T/ 48 T

Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina®Tn5建庫(kù)專(zhuān)用接頭

12416ES24/96

48 T/ 192 T

1×dsDNA HS Assay Kit
即用型Qubit試劑

12642ES60/76

100 T/500 T

Qubit專(zhuān)用檢測(cè)管

83509ES03/10

500支/5000 支

PCR金屬磁力架

80460ES03

個(gè)



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