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qPCR常見問題及解決方案對于從事分子生物學研究的實驗猿來說，RT-qPCR實驗可謂是老生常談了?？此骑L平浪靜，只需“RNA提取-反轉(zhuǎn)錄-熒光定量”這些按部就班的操作，實則險象環(huán)生，一丁點的出錯都有可能讓我們懷疑人生。即便如此，在CNS的召喚下我們?nèi)耘f一遍遍的重復(fù)、重復(fù)、再重復(fù)。小翊深有體會，為此嘔心瀝血整理出來常用的SYBRGreen染料法RT-qPCR實驗的幾個常見問題，并給出了可能的原因和解決方案，希望大家能夠順利度過RT-qPCR大關(guān)。RT-qPCR實驗中，大家或多或少會遇到擴增曲線異常
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抗體親和純化系列產(chǎn)品概述ProteinA、ProteinG是常應(yīng)用于抗體親和純化和免疫沉淀的蛋白。將ProteinA、G分別固定在不同的介質(zhì)上，或同時將ProteinA、G共價偶聯(lián)到介質(zhì)表面，是從腹水、細胞培養(yǎng)物上清和血清中分離IgG和IgG亞家族的有效工具。ProteinL源于細菌，能更廣泛地結(jié)合各種類型以及亞類的免疫球蛋白，包括所有類型的IgG和單鏈可變區(qū)(ScFv)以及Fab片段。該蛋白只與抗體的kappa鏈結(jié)合而不會影響抗體的抗原結(jié)合位點，這一特性使其與蛋白A或蛋白G相比，能更廣泛地結(jié)合
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Hifair Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR （gDNA digester plus）
Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)——Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液，高質(zhì)量cDNA的*！研發(fā)背景RT-qPCR是一個多步驟連貫實驗，逆轉(zhuǎn)錄的實驗結(jié)果只能通過后續(xù)qPCR進行判定，因此這一過程的成功與否十分關(guān)鍵。實驗過程中，你是否有遇到過這些問題？1.逆轉(zhuǎn)錄效率低導致后續(xù)qPCR實驗結(jié)果Ct值偏大？2.RNA具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)或GC含量高導致逆轉(zhuǎn)錄失??？3.逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品組分多，加樣麻煩誤差還大？。。。。。。 -
【干貨+試用】一文get核酸片段化酶知識要點近小翊在后臺收到一封留言，說建庫的片段化儀器壞了，不能做超聲打斷，問有沒有其他核酸打斷的方法推薦。核酸打斷的方法可以分為機器法和試劑法。其中機器法包含接觸式和非接觸式，接觸式主要包括探頭式和水浴超聲兩大類，這類方法比較實惠，但是直接接觸樣本會導致樣本損耗和污染，非接觸式主要包括Diagennode和Covaris這兩個品牌，這類儀器和耗材的成本太高，單個樣本的耗材成本達20-50元。試劑法指的是采用片段化酶對核酸進行打斷，這類方法成本較低，操作簡便省時
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搞事情啊，翊圣請來了四位ECL超級魔術(shù)師？？老板，都說你家ECL功能強，我給個飛克級的蛋白，能變出條帶嗎？辦不到？？老板，我多給點小費，把蛋白提高到皮克級，能不能變出條帶？還是辦不到？？那也太差勁了，還想不想混了！不，小伙，你理解錯了，是通通不是問題?。「彝驴?！點亮您的印跡膜，一觸即發(fā)ECL試劑，即化學發(fā)光法辣根過氧化物酶（HRP）底物，是目前Westernblotting檢測中為靈敏的試劑。目前市場上普通ECL試劑在使用過程中經(jīng)常出現(xiàn)易淬滅、高背景、不穩(wěn)定以及低豐度蛋白難以檢測等問題，影
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化繁為簡！小翊帶你輕松搞定qPCR數(shù)據(jù)分析熒光定量PCR（qPCR）是實驗室常用的一種技術(shù)，該技術(shù)可以應(yīng)用于基因表達分析、基因分型、病原體檢測、SNP分析等。qPCR實驗操作簡單，原理易懂，但面對一堆凌亂的數(shù)據(jù)，如何進行結(jié)果分析成了頭疼的問題，今天小翊將帶你學會如何化繁為簡，輕松獲得可以發(fā)表SCI的數(shù)據(jù)！qPCR常用的分析方法有相對定量和定量，需根據(jù)不同的實驗設(shè)計進行選擇。本期我們關(guān)注的是qPCR常見的應(yīng)用—基因表達分析，一般選擇相對定量法。1.實驗設(shè)計假設(shè)目前需要研究光誘導對擬南芥AtSUC2
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鏈霉親和素系列專題——一品多用，實現(xiàn)大價值一背景介紹鏈霉親和素是一種來源于阿維丁鏈霉菌（streptomycesavidinii）的生物素結(jié)合蛋白質(zhì)，其非特異性結(jié)合遠比親和素低，且與蛋清親和素在中性pH值具有凈正電荷和包含大約7%的碳水化合物相比，鏈霉親和素蛋白具有在中性pH值幾乎沒有凈電荷，不含有碳水化合物等更有利的化學性質(zhì)，所以它被廣泛用來作為抗生物素蛋白的替代品。二產(chǎn)品特點四聚體結(jié)構(gòu)：鏈霉親和素同源四聚體的形式存在，大小為66Kda；親和力強：每分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素
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YEASEN高性能預(yù)制膠系列產(chǎn)品——為您的實驗爭分奪秒產(chǎn)品背景相對于傳統(tǒng)的手工灌膠，使用預(yù)制膠可以避免接觸大量有毒試劑，節(jié)約大量時間，有效解決手工灌膠差異大等問題。YEASEN提供的蛋白預(yù)制膠包含梯度濃度和固定濃度，多種不同濃度可滿足不同蛋白電泳需求。其采用*的凝膠制備工藝制備而成，電泳效果極jia，兼容市面上各種電泳槽（Bio-Rad、天能、Life等），具有適應(yīng)性廣、分辨率高、穩(wěn)定性高、條帶清晰均勻等優(yōu)點。預(yù)制膠參數(shù)YEASEN高分辨率梯度預(yù)制膠，品質(zhì)更優(yōu)！·使用方便：即開即用；·適用范圍廣
