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轉座法DNA建庫試劑盒

2018-3-16  閱讀(719)

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HB180103

Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®

——90 min建庫

 

產品描述

Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®是基于轉座酶法,針對lllumina®高通量測序平臺開發(fā)設計的DNA建庫試劑盒,適用于1 ng和50 ng的基因組DNA、cDNA、擴增子(>500 bp)等樣本的建庫。本產品可在90min內完成建庫,且對不同GC含量樣本不具有或僅具有極低的偏好性。

  • 快速,單個樣品建庫時間少于90分鐘
  • 簡便,一步完成片段化和加接頭反應
  • 極低偏好性,不同GC含量樣本建庫測序獲得優(yōu)異結果
  • 適用珍貴樣本,zui低僅需1 ng Input DNA
  • 嚴格質控,zui高程度保障產品性能與批次穩(wěn)定性

產品性能

1. 簡便

本產品基于轉座酶法開發(fā),其核心原理是轉座酶及其轉制。產品整個操作流程僅包括片段化、擴增和純化過程,整體過程僅需 90分鐘,即可完成建庫。

    

 產品原理與流程

2. 文庫質量

使用Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對1 ng嗜鹽桿菌gDNA(65% GC樣本建庫,分別使用1.0×磁珠進行純化,0.8×/0.2×、0.7×/0.2×、0.5×/0.15×磁珠比例進行文庫分選,均獲得高質量文庫。

 

圖  Agilent 2100 Bioanalyzer文庫質量分析

3. 測序質量

使用Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對不同GC含量的微生物gDNA樣本建庫,并使用HiSeq 4000測序,結果顯示無論樣本起始量及GC含量,Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®所建文庫均獲得堿基質量好且覆蓋度均一的測序數(shù)據(jù)。

表  不同GC含量樣本測序數(shù)據(jù)

GC Content

Species

Input DNA

Mapped Reads%

Duplication

Average Depth (×)

Coverage (%)

Average

10×

15×

20×

35%

蠟狀芽孢桿菌

1 ng

86.45

0.23

325.76

99.64

99.64

99.64

99.64

99.64

50 ng

86.43

0.23

331.08

99.65

99.64

99.64

99.64

99.64

50%

大腸桿菌

1 ng

86.66

0.22

342.38

93.05

92.78

92.68

92.62

92.57

50 ng

86.65

0.22

358.69

93.07

92.78

92.70

92.64

92.59

65%

嗜鹽桿菌

1 ng

94.08

0.27

625.7

99.61

99.07

98.48

98.03

97.61

50 ng

94.21

0.27

776.21

99.96

99.91

99.85

99.78

99.71

 

圖  不同GC含量樣本測序偏好性圖譜

Input 1 ng DNA

                          

蠟狀芽孢桿菌(GC 34%)                 大腸桿菌(GC 51%)                       嗜鹽桿菌(GC 65%)

Input 50 ng DNA

                                                

蠟狀芽孢桿菌(GC 34%)                          大腸桿菌(GC 51%)                      嗜鹽桿菌(GC 65%)

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Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina(for 1ng)

12206ES08

8 libraries

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6155

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Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina(for 50ng)

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Hieff NGSTM Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix

12302ES05

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