Coelenterazine Native天然腔腸素

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Coelenterazine Native天然腔腸素又稱腔腸素游離酸，是海腎熒光素酶（Rluc）和Gaussia熒光素酶（Gluc）等多種熒光素酶的作用底物，也是水母發(fā)光蛋白的輔助因子，應(yīng)用非常廣泛，可用于檢測(cè)活細(xì)胞中鈣離子濃度，基因報(bào)告分析，BRET（生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移）研究，ELISA，HTS，以及組織或細(xì)胞中ROS水平的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。

產(chǎn)品性質(zhì)

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸；粉末-20℃避光干燥保存，建議保存在惰性氣體環(huán)境下，避免接觸空氣；長(zhǎng)期保存于-70℃。

腔腸素的溶解

對(duì)于所有進(jìn)行熒光信號(hào)檢測(cè)的試驗(yàn)建議溶液現(xiàn)用現(xiàn)配。建議可用乙醇或丙二醇配制成儲(chǔ)存液（配制濃度可參考文獻(xiàn)推薦）。在使用時(shí)需將儲(chǔ)存液用合適的緩沖液稀釋成工作液。

注意：1）在用蒸餾水或者PBS及其他的溶液進(jìn)行腔腸素儲(chǔ)存液的稀釋時(shí)需排除稀釋液中的氣泡。同時(shí)工作液建議呈弱酸性，既可以減緩腔腸素的氧化，同時(shí)也可防止沉淀的析出。但是弱酸也有可能對(duì)后續(xù)熒光強(qiáng)度RLU的檢測(cè)造成誤差。

            2）腔腸素的工作液不穩(wěn)定，避免過(guò)夜保存。

注意事項(xiàng)

1）保存時(shí)若接觸空氣，時(shí)間過(guò)久會(huì)使得腔腸素氧化，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確性。

2）對(duì)于儲(chǔ)存液的制備，較穩(wěn)定的是保存于丙二醇中，同時(shí)可加入還原劑如L-抗壞血栓，β-巰基乙醇，DTT，DTE（二硫赤糖醇），或少量的鹽酸。還原劑的存在可能會(huì)破壞熒光素酶的結(jié)構(gòu)，也會(huì)影響腔腸素的氧化速率。

3）腔腸素在醇類(lèi)物質(zhì)中的冰凍保存可能會(huì)導(dǎo)致沉淀的析出（和濃度有關(guān)），可通過(guò)將溶液加熱至50-60℃至其溶解。在使用前請(qǐng)確保眼觀無(wú)沉淀。

4）zui適溶劑的選擇取決于多種因素，如還原劑。對(duì)于水母發(fā)光蛋白的檢測(cè)，可選用β-巰基乙醇，因?yàn)榇诉€原劑能夠使水母發(fā)光蛋白更好地與腔腸素作用。但對(duì)于Gluc蛋白的檢測(cè)，由于蛋白中含有5對(duì)二硫鍵，在還原劑的存在狀態(tài)下不能夠檢測(cè)到熒光信號(hào)。

5）腔腸素在不同溶劑中的溶解特性：（單位：mg/mL）

注：a：腔腸素的丙二醇溶液在室溫下的溶解度較低，但是在-70℃的狀態(tài)下沒(méi)有沉淀析出。

b：腔腸素在β-巰基乙醇中的溶解度在室溫和60℃時(shí)都是zui高的，但能夠穩(wěn)定存在的時(shí)間還有待進(jìn)一步測(cè)試。

6）當(dāng)使用多孔板進(jìn)行熒光值的檢測(cè)時(shí)，建議通過(guò)設(shè)置對(duì)照孔來(lái)消除由于腔腸素在工作液中不斷被氧化所帶來(lái)的誤差。

7）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

HB180420