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11111ES92第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 11111ES92 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):1217更新時(shí)間:2022-02-09 15:51:40

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10000 U
貨號(hào) 11111ES92 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過基因工程技術(shù)得到的新一代逆轉(zhuǎn)錄酶,與Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,其cDNA合成速度快,且熱穩(wěn)定性大幅度提高,可耐受高達(dá)60℃的反應(yīng)溫度,適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶

11111ES92

10000 U

1426.00

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶

11111ES93

50000 U

4626.00





產(chǎn)品描述


Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過基因工程技術(shù)得到的新一代逆轉(zhuǎn)錄酶,與Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,其cDNA合成速度快,且熱穩(wěn)定性大幅度提高,可耐受高達(dá)60℃的反應(yīng)溫度,適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時(shí),該酶增強(qiáng)了與模板的親和力,非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase合成全長cDNA的能力也有了提升,可擴(kuò)增長達(dá)19.8 kb的cDNA。


產(chǎn)品組分

編號(hào)

組分

產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格

11111ES92 (10000 U)

11111ES93 (50000 U)

11111-A

5×Hifair® Ⅲ Buffer

250 μL

1250 μL

11111-B

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase (200 U/μL)

50 μL

250 μL


產(chǎn)品應(yīng)用

全長cDNA文庫構(gòu)建;終點(diǎn)法PCR;實(shí)時(shí)定量PCR等。


活性定義

以Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物,在37℃,10 min內(nèi),將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。


運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期1年。


注意事項(xiàng)

1)請(qǐng)保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈;操作時(shí)需穿戴干凈的手套、口罩;實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free,以防止RNase污染;

2)所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行,防止RNA降解;

3)為保證高效率逆轉(zhuǎn)錄,建議使用高質(zhì)量的RNA樣本;

4)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
5)本產(chǎn)品僅作科研用途。

第一鏈cDNA合成操作步驟

1. RNA變性(此步為可選步驟,RNA變性有助于打開二級(jí)結(jié)構(gòu),可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。)

組分

使用量

RNase free H2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

1 μL

or Random Primers (50 μM)  

or 1 μL

or Gene Specific Primers (2 μM)

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 10 pg -5 μg或mRNA:10 pg-500 ng

65℃加熱5 min,迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應(yīng)液后加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液,并用移液器輕輕吹打混勻。

2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制(20 μL體系)

組分

使用量

上一步的反應(yīng)液

13 μL

5×Hifair® Ⅲ Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase (200 U/μL)

1 μL

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置

溫度

時(shí)間

25℃

5 min

55℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】1)當(dāng)使用Random Primers時(shí),需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers,此步可省略;

2)逆轉(zhuǎn)錄溫度:推薦使用55℃;對(duì)于高GC含量模板或者復(fù)雜模板,可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高到60℃;

3) 可將逆轉(zhuǎn)錄時(shí)間延長到45-60min,有助于提高產(chǎn)量;

4)85℃加熱5 min,目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。

※ 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng),也可-20℃短期保存,若需長期保存,建議分裝后,于-80℃保存,避免反復(fù)凍融。


相關(guān)產(chǎn)品


產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)

11121ES60

100 T

Hifair®II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus)

11123ES60

100 T

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix  

11137ES60

100T

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)

11139ES60

100T

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus)

11141ES60

100T

Hifair® qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox )

11201ES08

5 mL

Hifair® qPCR SYBR® Green Master Mix (Low Rox Plus) 

11202ES08

5 mL

Hifair® qPCR SYBR® Green Master Mix (High Rox Plus) 

11203ES08

5 mL

Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法,No Rox)

11195ES08

5 mL

Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法,Low Rox)

11196ES08

5 mL

Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法,High Rox)

11197ES08

5 mL

Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法,No Rox)

11198ES08

5 mL

Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法,Low Rox)

11199ES08

5 mL

Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法,High Rox)

11200ES08

5 mL


HB210922



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