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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40612ES25 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） | *（元） |
MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原體檢測試劑盒 | 40612ES25 | 25 T | 1653 | 952.00 |
40612ES60 | 100 T | 6283 | 3352.00 |
產品描述
MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit是利用Yeasen*的等溫擴增技術，專門針對細胞培養(yǎng)液中支原體污染的快速檢測產品。較以往支原體檢測產品（貨號：40611），本試劑盒中加入了UDG酶，以便去除含dU的PCR產物氣溶膠污染，在極大程度上抑制假陽性反應，提高檢測的準確度。而且加入的UDG酶在室溫下起作用，且對溫度敏感、易于滅活，不影響實驗結果。
主要原理是若細胞培養(yǎng)物被支原體污染，支原體DNA的保守序列會被大量、快速地擴增，使反應液由藍紫色變成天藍色，結果肉眼可辨，無需電泳。
翌圣MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit可以檢測多種支原體，包括細胞培養(yǎng)過程中常見的8種支原體。傳統(tǒng)巢式PCR支原體法檢測法易受細胞培養(yǎng)上清中抑制物的影響，產生假陰性結果；反應后需開蓋電泳檢測，增加污染導致的假陽性風險。一步法支原體檢測試劑盒*沒有上述缺點，且其檢測靈敏度、準確性遠遠高于PCR法。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規(guī)格 | |
40612ES25/25T | 40612ES60/100T | ||
40612-A | MycAwayTM -Color A | 600 μL | 600 μL×4 |
40612-B | MycAwayTM -Color B | 25 μL | 25 μL×4 |
40612-C | Positive Control | 10 μL | 10 μL×4 |
40612-D | 礦物油 | 500 μL | 500 μL×4 |
運輸與保存方法
冰袋運輸。
-20 °C避光保存，保質期18個月。若較長時間不用，請注意避光保存。
注意事項
1）使用本試劑前請仔細閱讀說明書。
2）整個實驗，應規(guī)范操作，包括反應體系的配制、樣本處理及加樣。
3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4）本產品僅作科研用途！
使用方法
1. 支原體待檢樣本準備
貼壁細胞：直接吸取上清。建議在細胞傳代或換液3天以上，且匯合度達到90%左右時取樣，此時上清中支原體含量較高，便于檢出。
懸浮細胞：500 g離心5 min后，吸取上清。建議在細胞傳代或換液3天以上時取樣，此時支原體含量較高，便于檢出。
2. 反應體系
將MycAwayTM -Color從-20 °C取出，溶解后顛倒混勻，瞬時離心確保所有液體落到管底。根據待檢測樣品量，配制如下體系（通常實驗需要設置陰性對照和陽性對照）：
單次反應體積 (μL) | 總體積 (μL) | ||
MycAwayTM -Color A | 24 | × 樣品數 | _____ |
MycAwayTM -Color B* | 1 | _____ |
【*】：B組分為粘稠液體，取樣小心槍頭粘連。。
3. 加樣
待測樣品：向其余反應管中加入1 μL待測培養(yǎng)上清；
陰性對照：第一支反應管中不加入任何樣品，作為陰性對照；
陽性對照：向最后一個反應管中加入1 μL Positive Control，作為陽性對照。
【注】：1) 如果反應是在水浴鍋中進行，則每管加入20 μL礦物油，以防止液體蒸發(fā)導致結果的誤差。如果反應是在PCR儀中進行，不需要加礦物油。
2）實驗室中支原體污染十分常見，鑒于本試劑盒反應靈敏，建議用戶在超凈臺中配制組分，以免出現(xiàn)假陽性結果。
4. 反應條件
加完樣后，先將樣品在30 ℃放置5 min，再在水浴鍋或PCR儀中，恒溫63 °C孵育60 min。
【注】：本試劑盒所用酶對溫度非常敏感，強烈建議使用PCR儀操作；如用水浴鍋，應先加熱使其達到規(guī)定溫度后再反應。溫差超過2 °C，將導致擴增效率降低，使陽性反應無法在說明書規(guī)定的時間內達到典型的天藍色。
5. 結果判斷
63 °C反應60 min后，立刻取出反應管，放于室溫。在光線良好的環(huán)境中觀察反應結果（建議以白紙為背景）。如果反應液仍為藍紫色，則判定為陰性；若反應液為天藍色，則判定為陽性。
【注】：在63 °C反應的時間必須準確計時，超過說明書規(guī)定的反應時間可能會出現(xiàn)假陽性。反應管不可開蓋，否則會出現(xiàn)氣空氣中支原體污染反應，出現(xiàn)假陽性的現(xiàn)象。
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