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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
13278ES60Hieff® Multiplex PCR Kit（Mg2+ free）
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 13278ES60 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：415更新時(shí)間：2023-03-15 09:47:40
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 13278ES60 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
Hieff® Multiplex PCR Kit（Mg2+ free）
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Hieff® Multiplex PCR Kit（Mg2+ free） | 13278ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Kit（Mg2+ free） | 13278ES76 | 500 T | 3165.00 |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品適用于多重PCR實(shí)驗(yàn)。Hieff® Multiplex PCR Kit（Mg2+ free）由多重PCR酶制劑與不含Mg2+的2×擴(kuò)增緩沖液組成，在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)，可在反應(yīng)體系中根據(jù)需求添加適量Mg2+。該產(chǎn)品的擴(kuò)增具有高均一性、高特異性和高靈敏度的特點(diǎn)，可以對(duì)20對(duì)及以上引物體系進(jìn)行特異、均一的擴(kuò)增反應(yīng)。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
13278ES60 (100T) | 13278ES76 (500T) | ||
13278-A | Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 100 μL | 500 μL |
13278-B | 2×Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free) | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
13278-C | MgCl2 (25 mM) | 1×600 μL | 3×1 mL |
【注】:13278-A組分避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸與保存方式
冰袋運(yùn)輸。-20℃儲(chǔ)存，有效期1年。
反應(yīng)體系
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free) | 25 | 1× |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量：1 ng-200 ng | - |
MgCl2（25 mM） | y | 1-5 mM |
無(wú)菌超純水 | up to 50 | - |
【注】: 1）DNA量和引物濃度均為推薦起始投入量和濃度，可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整，選擇適投入量和濃度；
2）引物濃度：建議每條引物的濃度在0.1 μM-0.5 μM參考范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整；
3）Hieff® Multiplex PCR Buffer（Mg2+ free）中已經(jīng)包含擴(kuò)增所需要的dNTP、鹽離子等，但不包含Mg2+，需在反應(yīng)體系中根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求添加適量Mg2+。
擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度（℃） | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 | 30 sec | 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】: 1）在PCR儀上設(shè)置上表中的反應(yīng)程序進(jìn)行多重PCR反應(yīng)（設(shè)置熱蓋溫度至105℃左右）
2）使用本產(chǎn)品獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物需添加Loading buffer后用于電泳檢測(cè)。
3）延伸時(shí)間以長(zhǎng)擴(kuò)增片段為準(zhǔn)，可適當(dāng)延長(zhǎng)延伸時(shí)間，但要避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間帶來(lái)的非特異性擴(kuò)增。
實(shí)驗(yàn)案例分享
以人基因組DNA為模板，使用10對(duì)引物進(jìn)行多重PCR反應(yīng)，分別擴(kuò)增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
擴(kuò)增體系配制 | 擴(kuò)增程序設(shè)置 | ||||||
組分 | 體積 | 終濃度 |
| 循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free) | 25 μL | 1× |
| 預(yù)變性 | 94℃ | 1 min | 1 |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 1 μL | - |
| 變性 | 94℃ | 30 sec | 35 |
Primer mix | 10 μL | 0.1 μM-0.5 μM |
| 退火 | 60℃ | 60 sec | |
模板DNA（100 ng/μL） | 1 μL | 2 ng/μL |
| 延伸 | 72℃ | 60 sec | |
MgCl2（25 mM） | 5 μL | 2.5 mM |
| 終延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
無(wú)菌超純水 | to 50 μL | - |
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電泳檢測(cè)
2%瓊脂糖凝膠；130 V；電泳時(shí)間1 h。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
Lane 1：100bp DNA marker
Lane 2-3：10重PCR產(chǎn)物
HB200512
