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供應(yīng)簡介

THP-1/NF-KB/Lu cell line是用人急性單核細(xì)胞性白血病細(xì)胞THP-1（懸浮細(xì)胞）通過慢病毒轉(zhuǎn)染方法，將REPOTMNF-kB報(bào)告基因轉(zhuǎn)入THP-1細(xì)胞構(gòu)建而成的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

詳細(xì)介紹

REPO^TMNF-kB報(bào)告基因的結(jié)構(gòu)是以4個重復(fù)的NF-kB轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)和TA box作為啟動子，啟動Luciferase的表達(dá)，并通過嘌呤霉素進(jìn)行篩選。THP-1/NF-KB/Lu cell line主要用于檢測細(xì)胞中NF-kB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活性和藥物篩選等。THP-1/NF-KB/Lu cell line的應(yīng)用大大節(jié)省了研究人員的寶貴時間和精力，為研究人員提供了更簡便，快速和有效的研究方法。

產(chǎn)品清單：

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品包裝	保存條件	產(chǎn)品編號
THP-1/NF-KB/Lu cell line	6×10⁶	1管	液氮	GM-023001
說明書	-	-	-	-

保存條件：

液氮保存，干冰運(yùn)輸。

穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的穩(wěn)定性：

基因組的不穩(wěn)定性是所有穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株共同存在，且不可避免的一個生物現(xiàn)象。因此，我們建議客戶在拿到細(xì)胞后的開始階段就進(jìn)行大量細(xì)胞凍存是很關(guān)鍵的。

培養(yǎng)條件：

1. 培養(yǎng)基：RPMI1640（2 mM L-glutamine,1.5g/L sodium bicarbonate,4.5 g/L glucose,10 mM HEPES and 1.0 mM sodium pyruvate ）+10%胎牛血清+100ug/ml雙抗；選擇培養(yǎng)：+0.5～1μg/ml嘌呤霉素

2. 培養(yǎng)條件：37℃，5%CO2

3. 凍存條件：常規(guī)培養(yǎng)基+20%胎牛血清+10%DMSO

細(xì)胞培養(yǎng)：

1. 細(xì)胞復(fù)蘇

（1）. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消毒，紫外照射40min以上。
（2）. 恒溫水浴箱37℃預(yù)熱20min，備用。
（3）. 從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入37℃水浴箱中，快速搖晃，直至凍存液*融化。

注：水浴箱中的水不能接觸瓶蓋。
（4）. 將細(xì)胞懸液移入15ml離心管，緩慢加入4ml培養(yǎng)液，離心（1000r/min，5min）。
（5）. 用培養(yǎng)基懸液混懸沉淀細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度，放培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2. 細(xì)胞培養(yǎng)

（1）. 細(xì)胞每隔3～4天傳代一次，每次傳代密度為7×10⁵個/ml。
（2）. 為了保證細(xì)胞的良好生長狀態(tài)，細(xì)胞培養(yǎng)時密度不能大于2×10⁶個/ml。

3. 細(xì)胞凍存

凍存時的細(xì)胞密度應(yīng)達(dá)到5～7×10⁶個/ml，這才能保證更好的復(fù)蘇效率。

THP-1/NF-KB/Lu cell Luciferase的檢測：

1．將適量濃度的THP-1/NF-KB/Lu cell細(xì)胞接種于96孔板/24孔板/6孔板等，37℃，5%CO₂，過夜培養(yǎng)；

2．研究者根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，向THP-1/NF-KB/Lu cell 中加入所需生物制劑（siRNA、shRNA、化合物、慢病毒表達(dá)載體、蛋白等）；

3．繼續(xù)培養(yǎng)18~36h后，按照熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒得要求，進(jìn)行Luciferase表達(dá)量的檢測。

注意事項(xiàng)：

細(xì)胞為凍存狀態(tài)運(yùn)輸，收到細(xì)胞后建議馬上復(fù)蘇、培養(yǎng)。如果暫時不使用請繼續(xù)保持液氮儲存。

產(chǎn)品價(jià)格：

貨號	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報(bào)價(jià)/元
GM-023001	THP-1/NF-kB/Lu cell line細(xì)胞	Genomeditech	1管	20000

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