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Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素

地:Invivogen

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2024/9/1 21:01:14

訪問次數(shù):2697

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上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
網(wǎng)址:
www.yeasen.com

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供應簡介
Blasticidin S是一種來自Streptomyces griseochromogenes的核苷肽類抗生素,通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsr或BSD耐受基因的轉染細胞。殺稻瘟菌素具有快速而強效的作用模式,很低的抗生素濃度便能導致細胞迅速死亡。


詳細介紹

 

產(chǎn)品信息Invivogen原裝,現(xiàn)貨供應):

貨號
名稱
產(chǎn)地
規(guī)格
報價
*
庫存
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素
(濃度10mg/1ml
Invivogen
10mg
598
ant-bl-5
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素
(濃度10mg/1ml
Invivogen
10mg*2
1050
1050
ant-bl-5
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素
(濃度10mg/1ml
Invivogen
10mg*5
2310
2150
ant-bl-5
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素
(濃度10mg/1ml
Invivogen
10mg*10
4200
3700

 
Blasticidin S是一種來自Streptomyces griseochromogenes的核苷肽類抗生素,通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsrBSD耐受基因的轉染細胞。殺稻瘟菌素具有快速而強效的作用模式,很低的抗生素濃度便能導致細胞迅速死亡。
基本信息:
CAS3513-03-9分子式: C17H26N8O5, 1 HCl 純度:>95%HPLC
分子量: 458.90 濃度:10 mg/ml in HEPES 緩沖液,pH 7.5
:
抗性基因:
目前經(jīng)克隆和測序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種,一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.乙酰基轉移酶基因bls,另外兩種是脫氨酶基因,包括為從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。bsr BSD基因是zui主要的選擇性標記基因,用于哺乳動物和植物細胞的基因轉移實驗,也可以用于E.Coli中。
應用濃度:
1Escherichia coli(推薦濃度:25-100 µg/ml
E. coliBlasticidin S的敏感性稍差,轉化子對Blasticidin S具有耐受性,可以用低鹽LB培養(yǎng)基(pH 8)進行篩選,添加100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。推薦使用InvivoGens Fast-Media®Blas以獲得結果。
2)哺乳動物細胞(推薦濃度:1-50 µg/ml
哺乳動物細胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/ml。初次實驗建議通過滅殺曲線來確定*使用濃度。
一些哺乳動物細胞的建議工作濃度:

細胞
種屬
組織
培養(yǎng)基
Blasticidin S Concentrationμg/ml
HeLa
Human
Uterus
DMEM
3-10
293
Human
Kidney
DMEM
3-10
B16
Mouse
Melanoma
RPMI
3-10
PC1.0
Hamster
Adenocarcinoma
RPMI
10-30

操作步驟(哺乳動物穩(wěn)轉株篩選):
Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/ml。攜帶bsrBSD基因的質(zhì)粒轉染到細胞中,在含有Blasticidin S的正常生長培養(yǎng)基中孵育,用于篩選穩(wěn)定轉染細胞株。
1)轉染后48h,用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細胞傳代;(注:細胞處于活躍分裂期時抗生素工作。細胞密度太高,抗生素效率降低。細胞分盤時覆蓋率不超過25%
2)每3-4天去除培養(yǎng)基,加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基;
37天后檢測細胞集落形成。根據(jù)宿主細胞種類和轉染/篩選效率,集落形成可能需要再增加一周或更久。
4)轉移5-10個耐受克隆到35mm細胞盤中。加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細胞毒性實驗進行檢測。
Invivogen Blasticidin S的應用和具體濃度:

物種
細胞系/
載體/質(zhì)粒
Blasticidin S Concentration μg/ml
E. coli
MIC128
pHASH102
250
B.subtilis
RM125
pGETS109
500
P. falciparum
3D7/GC03 parasites
pLN-ACP-V5
2.5
Dictyosium discoideum
DAip1-null
pBsr2
10
Rat
NIH3T3
pcDNA6.2
5
HeLa
pEF-BOS
2
Human
LLCMK2
SeVdp
5
Human
293
pOG44
15
Mouse
B16
pCMVβ
50
Mouse
B16
pBLAST
50

Invivogen提供攜帶bsr基因的質(zhì)粒產(chǎn)品:

質(zhì)粒名稱
抗性基因
貨號
規(guī)格
產(chǎn)地
pSELECT-blasti-mcs
bsr
psetb-mcs
pSELECT-blasti-LacZ
bsr
psetb-lacz
pMONO-blasti-mcs
bsr
pmonob-mcs
pMONO-blasti-gfp
bsr
pmonob-gfp
pVITRO1-blasti-mcs
bsr
pvitro1-bmcs
20μg
invivogen
pVITRO1-blasti-GFP/LacZ
bsr
pvitro1-bgfplacz
20 μg
invivogen
pVITRO2-blasti-mcs
bsr
pvitro2-bmcs
20μg
invivogen
pvitro2-bgfplacz
20μg
psiRNA-h7SKblasti G1 Kit
ksirna3-b21
1 Kit
invivogen
pcpgvtb-mcsg2
20μg
invivogen
pCpGfree-vitroB
bsr
pcpgvtb-lz
20μg
invivogen

 

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