在實(shí)驗(yàn)室工作中,大分子樣品的濃縮是一個常見且重要的環(huán)節(jié)。然而,在操作過程中,可能會碰到樣品損失、污染、氣泡產(chǎn)生、濃縮樣品量測量等各種各樣的情況和困難,這對濃縮樣品的獲得以及回收率的計(jì)算造成了挑戰(zhàn)。
今天小賽來推薦一個良好實(shí)踐來幫助提高樣品的回收率并方便測量濃縮樣品的體積。首先有請我們實(shí)驗(yàn)的黃金組合成員閃亮登場:
Picus® 2電動移液器
賽多利斯
延長型吸頭
Vivaspin®
超濾濃縮管
這里少損失一點(diǎn),那里少損失一點(diǎn),最后收獲的樣品就更多。用正確方式打開超濾濃縮管,濃縮樣品一點(diǎn)也不能放棄!
樣品濃縮步驟
1
準(zhǔn)備Vivaspin® 濃縮管
a. 去除防腐劑:在移液模式下,吸排緩沖液三至五次以清洗膜
b. 鈍化:在包括膜的濃縮管內(nèi)管中反復(fù)吸打鈍化溶液三到五次,然后將其插入超濾濃縮管的外管并清除該溶液(用鈍化緩沖溶液清洗膜和裝置可以減少相關(guān)分子與膜或裝置表面之間的非特異性結(jié)合)
2
使用離心機(jī)進(jìn)行濃縮
濃縮時(shí)間取決于樣品類型、相對離心力、溫度和所需濃縮系數(shù)。
3
使用Picus® 2 手動移液模式
測定濃縮樣品體積
我沒看錯吧?最后一步是“使用Picus® 2 手動移液模式測定濃縮樣品體積”?!沒錯,用Picus® 2電動移液器就能測定濃縮樣品體積!
a.將移液器設(shè)為手動移液模式,準(zhǔn)備好相關(guān)設(shè)置
b.根據(jù)樣品的動態(tài),隨時(shí)掌控操作節(jié)奏,確保樣品完整回收
c.讀取移液器顯示屏上的總吸入量
這樣我們就在回收濃縮樣品的同時(shí)也完成了濃縮樣品量的測定了!
在此基礎(chǔ)上,使用延長型移液器吸頭可確保在長容器中接觸到整個樣本的同時(shí)保護(hù)樣本和移液器免受污染。確保樣品安全不容忽視!
更多良好實(shí)踐細(xì)節(jié)和操作技巧
《有效使用Picus® 2移液器和Vivaspin® 濃縮管》
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