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所 在 地上海市
更新時間:2024-10-22 14:28:18瀏覽次數(shù):3980次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)孕酮(progesterone)放免試劑盒,提供放免實驗檢測
供貨周期 | 一周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
胰島素(INS)放免試劑盒
[藥品名稱] 通用名:碘[ 125I]- 胰島素放射免疫分析藥盒盒
漢語拼音:Dian[ 125I] Yidaosu Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名:Iodine[ 125I]- Insulin Radioimmunoassay Kit
簡稱:碘[ 125I] 胰島素(Ins)放免藥盒
[使用目的] 用于定量測定科研血清或血漿中胰島素(Ins)的濃度。
[用途] 胰島素的測定主要用于對糖尿病的分型,即通過胰島素釋放實驗,區(qū)分糖尿病的類型。 另外對于研究胰島素β細(xì)胞的分泌功能、胰島素瘤的分析、探討冠心病機(jī)理等也有一定的意 義。
[試驗原理] 本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含胰島素(Ins)的樣 品和 125I 標(biāo)記的胰島素(Ins)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數(shù)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中胰島素(Ins) 的濃度。
[試劑主要組成成分] 1、 胰島素標(biāo)準(zhǔn)品:6 瓶,凍干品 A-F,濃度分別為 7、20、40、90、180、350mIU/L,使用 時加 1.0ml 溫育液溶解。 2、質(zhì)控血清:兩瓶,凍干品,使用時加 0.5ml 蒸餾水溶解。 濃度為: L: H: 3、抗 Insulin 血清: 一瓶,藍(lán)色溶液,2~8℃冷存。 4、125I-Insulin 標(biāo)記物:凍干品 1 瓶,< 88.23 kBq/100T,50 管加 5.5ml,100 管加 11ml,200 管加 22ml 溫育液溶解。 5、分離劑: 一瓶,含二抗血清、PEG 等,充分搖勻后使用,2~8℃冷存。 6、溫育液:一瓶,2~8℃冷存。 [儀器] 1、 γ-計數(shù)器 2、低溫離心機(jī) 樣本收集和保存: 220 微升科研血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉(zhuǎn)/分離心,取其上清液,放置玻 璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲存 6 個月。 嚴(yán)重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結(jié)果有影響。
[使用前準(zhǔn)備] 試驗前,恢復(fù)樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。 [實驗方法] 1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,凍干品按操作要求進(jìn)行溶解,平衡至少 30 分鐘 以上才可進(jìn)行操作; 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號,所有實驗均做雙管重復(fù); 3、 每個 NSB 管加入 200µl 溫育液,每個標(biāo)準(zhǔn)品“0”管 加入 100µl 溫育液; 4、 取每個濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(A~F)、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號的試管中; 5、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液; 6、 每管均各加入 100µl 抗體工作液,充分混勻; 7、 37℃溫育 2 小時; 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻; 9、 室溫放置 15 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 10、 用 γ-計數(shù)器測定各管計數(shù) CPM. 推薦檢測時間: 1 分鐘; 11、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
[實驗過程中應(yīng)注意] 1、 γ-計數(shù)器本底計數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%; 2、 加入放射性標(biāo)記物時,應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染; 3、 如果某一個樣本的測定值高于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
[質(zhì)量控制] 每次實驗操作應(yīng)至少采用兩個濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保每次實驗測定結(jié)果 的可靠性。 100 100 1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi); 2、 曲線方程應(yīng)采用佳擬合方式; 3、 重復(fù)樣本的測定結(jié)果相差在 15%以內(nèi)。 如不能同時滿足以上條件,則此次試驗結(jié)果無效,全部試驗需重新進(jìn)行。
[測定結(jié)果的計算] 1、 計算標(biāo)準(zhǔn)品(A~F)、質(zhì)控品和樣品與標(biāo)準(zhǔn)品 0 的比值(B/B0); 2、 劑量-反應(yīng)曲線按“對數(shù)劑量-結(jié)合率對數(shù)”(Log(dose-Log(B/Bmax))數(shù)學(xué)模型 或四參數(shù)數(shù)學(xué)模型擬合,通過每個標(biāo)準(zhǔn)品的 B/B0和其濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線; 3、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣本的濃度值,B/B0不在標(biāo)準(zhǔn)曲線之內(nèi)的樣本及其濃度
[實驗的局限性] 1、 本品僅供體外診斷使用,只能用于科研血清或血漿樣本的測定而不能用于其他體 液樣本; 2、 通過其它方法得到的 T 值與本品測定結(jié)果不具有直接的可比性;
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