RMC大鼠腎系膜細胞系
RMC大鼠腎系膜細胞系作為源自大鼠腎小球系膜區(qū)的功能細胞模型，因保留腎小球系膜細胞te有的收縮、增殖及基質分泌功能，在腎小球疾病機制研究中占據(jù)重要地位，成為探究系膜增生性腎炎及糖尿病腎病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠正常腎小球系膜組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化建立。細胞形態(tài)在靜息狀態(tài)下呈星狀或多角形，胞體伸展充分，具有多個細長突起，細胞核呈橢圓形，核仁清晰；受刺激后細胞收縮，突起縮短，體積縮小 20%，呈現(xiàn)梭形化改變。生長方式為貼壁生長，呈放射狀排列，形成網(wǎng)絡樣結構，接觸抑制較弱，傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數(shù)表現(xiàn)出系膜細胞特征：倍增時間約 60 小時，連續(xù)傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數(shù) 42 條）；系膜細胞標志物肌動蛋白（α-actin）、結蛋白（Desmin）免疫熒光陽性率分別為 97% 和 89%，不表達上皮細胞標志物 CK18；基礎狀態(tài)下膠原蛋白 IV（Col IV）分泌量達 18μg/10?細胞 / 24h，是腎成纖維細胞的 1.7 倍，硫酸ruan骨素蛋白聚糖表達豐富；無微生物污染，細胞純度達 96%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在腎小球疾病機制研究中，RMC 細胞經(jīng)高糖（30mM）處理 7 天后，細胞增殖活性提升 45%，Col IV 表達量增加 3.2 倍，血小板衍生生長因子（PDGF）受體磷酸化水平升高 2.8 倍，可模擬糖尿病腎病中系膜細胞增生及基質積聚過程，為解析代謝性腎損傷機制提供理想模型。藥物干預研究方面，該細胞在血管緊張素 II 受體拮抗劑處理下，Ang II 誘導的細胞收縮率下降 58%，細胞外基質分泌量減少 42%，能很好地反映腎臟保護藥物的作用效果，助力靶向治療研究。在腎小球炎癥研究領域，該細胞與巨噬細胞共培養(yǎng)時，脂多糖（LPS）刺激可使 RMC 的腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）分泌量增加 6.3 倍，白細胞介素 - 1β（IL-1β）釋放量上升 4.8 倍，激活的系膜細胞進一步促進巨噬細胞浸潤，形成 “炎癥放大循環(huán)" 模型，適用于研究腎小球腎炎的免疫病理過程。此外，將該細胞接種于腎小球基底膜支架上，可構建體外腎小球模型，用于評估藥物對腎小球濾過功能的影響。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗生素混合液及 5ng/ml 胰島素，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。誘導病理模型時，高糖處理采用含 30mM D - 葡萄糖的培養(yǎng)基，炎癥模型采用 1μg/ml LPS 刺激，處理時間根據(jù)實驗需求設定為 24-168 小時。培養(yǎng)基需每 3 天更換一次，避免代謝廢物堆積。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞突起回縮后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-6 天傳代一次，維持細胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇細胞存活率達 92% 以上，3-4 代內可恢復正常的收縮與分泌功能。運輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞突起形態(tài)，確認無異常漂浮物后進行后續(xù)實驗。該細胞系僅限科研使用，禁止用于臨床診療相關研究。
RMC 大鼠腎系膜細胞系以其穩(wěn)定的腎小球系膜細胞功能、明確的病理反應特性及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢，在腎小球疾病基礎研究與藥物開發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為揭示腎臟濾過單位損傷機制和開發(fā)新型腎臟保護策略提供了可靠的實驗平臺。
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