T47D [T-47D]人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
T47D [T-47D]人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系是研究激素依賴性乳腺癌的經(jīng)典模型，以高表達(dá)雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及對(duì)激素治療敏感為核心特征，在乳腺導(dǎo)管癌的激素調(diào)控機(jī)制、內(nèi)分泌治療耐藥及藥物研發(fā)中應(yīng)用廣泛，為解析雌激素驅(qū)動(dòng)的乳腺癌發(fā)生發(fā)展提供了可靠實(shí)驗(yàn)工具。
來源與背景：該細(xì)胞系于 1976 年從一名 54 歲女性乳腺導(dǎo)管癌患者的胸腔積液中分離建立，屬于 luminal 型乳腺癌細(xì)胞系。乳腺導(dǎo)管癌是乳腺癌中最常見的亞型，占比約 70%，其中激素受體陽性者占多數(shù)，而 T47D 因保留了完整的激素受體信號(hào)通路，成為研究激素依賴性乳腺導(dǎo)管癌的重要模型。與三陰性乳腺癌細(xì)胞系（如 MDA-MB-231）相比，其更能反映激素依賴的生長特性，尤其適合研究雌激素在乳腺癌發(fā)生中的作用機(jī)制，至今仍是乳腺導(dǎo)管癌內(nèi)分泌治療研究的關(guān)鍵參照。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣特征，貼壁生長且排列緊密呈鋪路石樣，細(xì)胞呈圓形或多邊形，細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核大而圓，核仁明顯，核質(zhì)比約 1:1.3，具有乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞的典型形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為激素受體高表達(dá)，免疫組化顯示 ER 陽性率達(dá) 90%，PR 陽性率 85%，ERα 蛋白表達(dá)量為正常乳腺上皮細(xì)胞的 5-8 倍，對(duì)雌激素刺激高度敏感，17β- 雌二醇處理后細(xì)胞增殖速率提升 30%；激素依賴生長，在無血清培養(yǎng)基中添加雌激素可維持細(xì)胞增殖，而去除雌激素或加入抗雌激素藥物（如他mo昔芬）則顯著抑制生長，IC50 值約為 0.5μM；增殖與侵襲能力，體外培養(yǎng)倍增時(shí)間約 60-72 小時(shí)，克隆形成率約 40%，裸鼠皮下接種成瘤率 100%，但成瘤速度較慢，6 周腫瘤體積約 0.8±0.2 cm3，Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿膜細(xì)胞數(shù)顯著低于 MDA-MB-231，體現(xiàn)較低的侵襲轉(zhuǎn)移潛能。傳代時(shí)采用常規(guī)消化液處理，因貼壁較牢固，需消化 4-5 分鐘，傳代比例 1:3-1:5，連續(xù)傳代 50 次后仍保持激素受體高表達(dá)及激素依賴特性。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗菌劑，培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。為維持激素敏感性，可在培養(yǎng)基中添加 10μg/ml 胰島素。細(xì)胞密度維持在 20%-70%，過度匯合會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞接觸抑制明顯，增殖速率下降 25%。對(duì)激素環(huán)境敏感，血清中雌激素水平波動(dòng)會(huì)影響細(xì)胞生長穩(wěn)定性，傳代時(shí)用含血清培養(yǎng)基終止消化，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 85% 以上，24 小時(shí)貼壁率超過 90%，細(xì)胞功能恢復(fù)正常。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，無支原體、細(xì)菌、真菌及常見病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)顯示 ER、PR 強(qiáng)陽性，HER2 陰性，符合 luminal A 型乳腺癌表型?；驕y(cè)序證實(shí) PIK3CA 基因突變，該突變與約 40% 的 ER 陽性乳腺癌患者一致，而 TP53 為野生型。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型，存在 1 號(hào)染色體長臂擴(kuò)增、8 號(hào)染色體三體等異常，與 50% 的乳腺導(dǎo)管癌患者遺傳學(xué)改變吻合。功能驗(yàn)證中，他mo昔芬處理后細(xì)胞周期 G1 期阻滯率達(dá) 60%，證實(shí)其激素治療敏感性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在激素機(jī)制研究中，該細(xì)胞系被廣泛用于探索雌激素通過 ER 調(diào)控下游靶基因（如 Cyclin D1、c-Myc）的分子機(jī)制，為理解 “雌激素 - ER - 靶基因" 通路在乳腺癌增殖中的作用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在內(nèi)分泌治療研究中，常用于評(píng)估抗雌激素藥物的療效及耐藥機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)長期用他mo昔芬處理可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥，耐藥細(xì)胞中 ER 共激活因子 SRC-1 表達(dá)上調(diào) 2 倍。在藥物研發(fā)方面，作為篩選新型 ER 拮抗劑的模型，近期研究發(fā)現(xiàn)一種新型 ER 降解劑可使 T47D 細(xì)胞 ER 蛋白水平下降 80%，抑制率顯著高于他mo昔芬。此外，該細(xì)胞系可用于研究激素與其他信號(hào)通路的交叉調(diào)控，與 PI3K 抑制劑聯(lián)合使用時(shí)，對(duì)細(xì)胞增殖的抑制率從單獨(dú)用藥的 40% 提升至 70%，為聯(lián)合治療提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
與其他乳腺癌細(xì)胞系相比，T47D 的優(yōu)勢(shì)在于其完整的激素受體信號(hào)通路及對(duì)內(nèi)分泌治療的敏感性，能更真實(shí)地模擬激素依賴性乳腺導(dǎo)管癌的生物學(xué)特性，為該類型乳腺癌的發(fā)病機(jī)制研究及內(nèi)分泌治療策略開發(fā)提供了不可替代的實(shí)驗(yàn)工具，持續(xù)推動(dòng)乳腺導(dǎo)管癌精準(zhǔn)診療的發(fā)展。
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